微生物指标及微生物检验

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1、生活饮用水卫生标准GB5749-2006生活饮用水标准检验方法GB5750-2006微生物指标及微生物检验的介绍广东省CDC微生物检验所严纪文我国旧的饮用水水质标准是1985年颁布实施的GB5749-85，标准检验方法为GB5750-85。该标准与国外的饮用水标准相比，主要差别在于微生物指标项目少，缺少有机物和消毒副产物指标。微生物指标只有细菌总数和总大肠菌群2项，不能确切的评价水质的卫生状况。修订后的标准，微生物学指标增加为6项：菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希氏菌、贾第鞭毛虫和隐孢子虫。同时在资

2、料性附件中增加了肠球菌和产气荚膜梭状芽胞杆菌。水质常规指标及限值修订前修订后微生物指标限值微生物指标限值细菌总数100CFU/mL菌落总数/（CFU/mL）100总大肠菌群每100mL水样中不得检出总大肠菌/（MPN/100mL或CFU/100mL）不得检出粪大肠菌群每100mL水样中不得检出耐热大肠菌/（MPN/100mL或CFU/100mL）不得检出游离余氯在与水接触30min后应不低于0.3mg/L,管梢末水不应低于0.5mg/L大肠埃希氏菌/（MPN/100mL或CFU/100mL）不得检出水质非常规指

3、标及限值修订前修订后微生物指标限值微生物指标限值-菌落总数/（CFU/100mL）500小型集中式供水和分散式供水部分水质指标及限值修订前修订后微生物指标限值微生物指标限值-贾第鞭毛虫/（个/10L）<1-隐孢子虫/（个/10L）<1生活饮用水水质参考指标及限值修订前修订后微生物指标限值微生物指标限值-肠球菌/（CFU/100mL）0-产气荚膜梭状芽胞杆/（CFU/100mL）0一、菌落总数修订前修订后细菌总数原理：细菌总数是指水样在一定条件下培养后（培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等）所得1ml水样

4、所含菌落的总数。按本规范规定所得结果只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数培养条件：36±1℃24h菌落总数定义：水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后，所得1ml水样所含菌落的总数。36±1℃48h二、总大肠菌群（埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属、肠杆菌属）除多管发酵法、滤膜法外，增加了酶底物检测方法多管发酵法修订前修订后多管发酵法原理：总大肠菌群系指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便，具有指示菌的一般特征，

5、故以此作为粪便污染指标评价饮水的卫生质量。总大肠菌群定义：总大肠菌群指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。结果：5个10ml管中阳性管数为0时，MPN值为0（主要针对出厂自来水或需每天检验一次的水样）结果：5个10ml管中阳性管数为0时，MPN值<2.2滤膜法修订前修订后滤膜法原理：用孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤水样,细菌被截留在滤膜上,将滤膜贴在选择培养上,经培养后,计数生长在滤膜上的典型大肠菌群菌落数。培养条件：37℃18-24h滤膜法定义：总大肠菌群滤膜法

6、是指用孔径为0.45μm的微孔滤膜过滤水样,将滤膜贴在添加乳糖的选择培养上,37℃培养24h，能形成特征菌落的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以检测水中总大肠菌群的方法。培养条件：37℃24±2h酶底物法酶底物法定义：总大肠菌群酶底物法是指在选择性培养基上能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组，该细菌群组能分解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化，以此技术来检测水中总大肠菌群的方法。培养基：MMO-MUG培养基（MinimalMediumONPG-MUG）。本方法可分为定性和定量。定量法：10管法、51孔定量法

7、培养条件：36±1℃24h能产生β-半乳糖苷酶的细菌群组分解ONPG使培养基呈黄色酶底物法的主要特点：优点：可同时判断水样中大肠菌群和大肠埃希氏菌检测时间较短，只需18-24h，最长需要28h无需确证试验操作简单，对试验条件和人员要求低缺点：检测成本高总大肠菌群三种方法的比较多管发酵法滤膜法酶底物法时间24-72h24-48h24-28h验证试验需要需要不需要步骤较繁较简便简便特殊设备显微镜显微镜、过滤设备压膜机价格低低较高三、耐热大肠菌群（埃希氏菌属、耐热克雷伯氏菌）检测方法：多管发酵法、滤膜法修订前修订后原

8、理：用提高培养温度的方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中大肠菌群区分开，在44.5℃仍能生长的大肠菌群,称为粪大肠菌群。定义：用提高培养温度的方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中大肠菌群区分开，在44.5℃仍能生长的大肠菌群,称为耐热大肠菌群。四、大肠埃希氏菌检测方法：多管发酵法、滤膜法、酶底物法大肠埃希氏菌多管发酵法定义：大肠埃希氏菌是指多管发酵法总大肠菌群阳性，在含有荧光底物的培养基上