临床微生物及微生物检验 临床标本检验课件

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1、临床标本的微生物学检验血液标本的细菌学检验目的和意义正常人的血液是无菌的一旦怀疑有菌血症，均应及早进行血液标本的细菌学检验血液标本的采集采集时间及次数发热早期或体温上升期抗菌药物使用前或下次用药前24h内3~4次，多部位采血采血部位肘静脉、股静脉、股动脉采血量=1/10血培养瓶中培养基量的不可从静脉留置针中采取血液标本!!!血液标本的培养基需氧菌硫酸镁肉汤、葡萄糖酚红肉汤胰化大豆胨肉汤聚茴香磺酸钠SPS对氨基苯甲酸、青霉素酶厌氧菌硫乙醇酸盐培养基牛心脑浸液肉汤血液标本的检验过程35℃孵育每天观察一次一旦发现有细菌

2、生长现象立即涂片观察，初步报告立即接种固体平板分离（血平板、巧克力平板）连续观察七天无菌生长，盲目接种固体平板分离（血平板、巧克力平板）证实无菌生长后报告阴性血液培养瓶中细菌的生长现象肉汤均匀混浊，发酵葡萄糖产气—————G-杆菌微混浊有绿色变化—————————肺炎链球菌血球层上面出现颗粒状生长，有自下而上的溶血———溶血性链球菌混浊并有胶冻状凝固——————病原性葡萄球菌表面有菌膜，培养液清晰——————枯草杆菌表面有菌膜，膜下呈绿色混浊———铜绿假单胞菌血液标本检验结果的报告阳性报告培养×日有××菌生长阴性

3、报告培养7日无细菌生长快速检验的方法双相培养基法溶解离心法荧光指示法16SrRNA鉴定法血液中常见的革兰阳性细菌金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、A群、B群链球菌、绿色链球菌、肺炎链球菌、肠球菌、厌氧链球菌产单核李斯特菌、炭疽芽胞杆菌、产气荚膜梭菌血液中常见的革兰阴性细菌脑膜炎奈瑟菌、卡他布拉汉菌伤寒及副伤寒沙门菌、大肠埃希菌、肺炎克雷白菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌、流感嗜血杆菌、气单胞菌、去硝化产碱杆菌、胎儿弯曲菌、沙雷菌、类杆菌、梭杆菌、布鲁菌、鼠疫耶尔森菌血液标本中特殊细菌的检验沙门菌属胆汁葡萄糖肉汤35℃泥砂样

4、沉淀布鲁菌Castenada双相培养基3周后无菌生长阴性厌氧菌厌氧培养瓶80ml培养基刃天青指示剂14天后无菌生长阴性有菌生长厌氧鉴定脑脊液标本的检验正常人的脑脊液是无菌的一旦感染，病情危急脑脊液标本的采取和运送由临床医师在无菌条件下采取无菌容器盛放，立即送检需要保温35℃涂片检查非常重要涂片检查对于新型隐球菌特别是小荚膜者易与白细胞相混淆0.1%甲苯胺蓝染色新型隐球菌红色圆球体，荚膜不着色，白细胞成深蓝色，红细胞不着色培养检查及时接种巧克力平板、血平板35℃5~10%CO218~24小时脑脊液中的抗酸杆菌检查离

5、心4000r/min30min取沉淀涂片抗酸染色静置室温18~24小时结网试验抗酸染色或金胺O染色培养罗-琴培养基或7H-10培养基脑脊液中的常见细菌革兰阳性细菌金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、B群链球菌、肺炎链球菌、消化链球菌结核分支杆菌、产单核李斯特菌新型隐球菌、白色念珠菌脑脊液中的常见细菌革兰阴性细菌脑膜炎奈瑟菌、卡他布兰汉菌流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、产气肠杆菌、肺炎克雷白菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、脑膜炎败血黄杆菌、类杆菌钩端螺旋体上呼吸道标本的检查上呼吸道是开放性器官有许多细菌寄生奈瑟菌、绿色链球菌、肺炎

6、链球菌、葡萄球菌、流感嗜血杆菌、类白喉棒状杆菌、真菌必须注意菌群与疾病的关系标本采集鼻咽拭子咽拭子涂片检查白喉棒状杆菌培养检查血平板、巧克力平板、EMB百日咳鲍特菌：鲍金平板白喉棒状杆菌：吕氏血清斜面脑膜炎奈瑟菌：巧克力平板（CO2）流感嗜血杆菌：巧克力平板（CO2）上呼吸道标本的常见细菌正常菌群α和γ链球菌、微球菌、表皮葡萄球菌、四联球菌、白喉以外的棒状杆菌、乳杆菌其他奈瑟菌、其他嗜血杆菌上呼吸道标本的常见细菌上呼吸道常见致病菌化脓性链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌脑膜炎奈瑟菌白喉棒状杆菌、结核分支杆菌白色念

7、珠菌流感嗜血杆菌、百日咳鲍特菌肺炎克雷白菌、大肠埃希菌铜绿假单胞菌下呼吸道标本的检查正常下呼吸道细菌情况对下呼吸道的感染采用痰液标本进行细菌学检查标本采集晨痰方法：自然咳痰法气管镜下采集气管或环甲膜穿刺需避免上呼吸道正常菌群的污染涂片检查合格痰液标本大量吞噬细胞未见鳞状上皮细胞不合格痰液标本大量鳞状上皮细胞未见吞噬细胞培养检查标本前处理均质化法洗涤法分离培养血平板巧克力平板沙保弱琼脂特殊培养下呼吸道标本的常见细菌革兰阳性细菌化脓性链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌白喉棒状杆菌、结核分支杆菌厌氧菌、放线菌、奴卡菌革

8、兰阴性细菌脑膜炎奈瑟菌流感嗜血杆菌、肺炎克雷白菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、产气肠杆菌、嗜肺军团菌尿液标本的微生物学检验正常的尿液是无菌的任何怀疑尿路感染或全身感染的患者均可进行尿液细菌培养尿液是细菌的良好培养基，容易受污染尿液标本的采集用药前采取中段尿女性：清洗外阴部，留取中段尿5~10ml，月经期不得采取男性：清洗尿道口，留取中段尿5~10ml儿童：清洗尿道口，留取中