微生物检验临床标本微生物学检验概述

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1、第三十四章临床标本微生物学检验概述本章考点:临床标本微生物学检验(血液、脑脊液、痰、尿液、粪便、性传播疾病、创伤)(1)常见病原菌(2)标本采集及运送(3)检验方法(4)临床意义一、临床标本细菌检验的基本程序广肉眼够厂^片變色镇檢亠屛直接飙—抗馳夜•增菌堵养—核醸解丄『儒氯分离警弄亠分离墩和十炭氣分离毎廿fSa分薦罐界二、血液感染正常人的血液是无菌的。菌血症是指在血液中可检测到细菌,包括一过性和持续性在血中存在。败血症是指病原菌侵入血流后,在其中大量繁殖并产生毒性产物,引起全身中毒症状。脓毒血症是指化脓性细菌败血症时,细菌通过血流扩散至全身其他组织或器官,产生新的化脓性病灶。(—)常见病原菌

2、见表5-34-1甲三阴住甲立駅ft矇・金H赳箱轉隊雷、穂宜薛划摩询础KRh肇

3、戦奈萃H,击綁鱼»、卫甬轻球苗•.帰畑環飢WrW.草辭色殘球曲忏菌产单拔如胞李划杨繭・後鱼杯甫、结较务犬就决希斎、桥痢、蓟构*移W甫.:*雷兼栉轨产弋需懈f电諂亂芳审常、钩靈環%«k不須秆驭負華匏歯、厦黒旳血存痴・希參痣弘、喑罪翎1曲(炎If常(二)标本采集1.采血时间和频率:一般在病人发热初期或高峰期采集,或根据不同的发热情况在未用抗生素前采集。但怀疑细菌性心内膜炎时,血培养不少于三次。2.采血量:一般为静脉采血,采血量一般以培养液体积的1/10为宜。成人采血量10〜20inl,儿童3〜5ml;婴儿1〜2nd。3

4、.床边直接注入血液培养基,否则用SPS抗凝剂送检,不得用EDTA,枸椽酸钠抗凝。4.检查血管内导管有无细菌污染,可无菌操作,剪下导管5cm远侧段,置无菌容器内送检。(三)微生物分离培养和鉴定1.培养基的选择:为提高阳性率通常先用增菌培养基培养。用自动血培养分析仪时选用相应的血培养瓶,如需氧+厌氧,需氧+咼渗等。1.分离和鉴定:当观察有细菌生长吋或血培养仪阳性报警吋,应及吋作如下检验:(1)涂片染色镜检,结果及时与临床联系。(2)转种血平板、巧克力平板、厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养纯菌再进行鉴定。(3)同时做药敏试验,结杲及时报告临床作治疗参考。(四)报告方式阴性结果:7天报告无细菌生

5、长。疑为亚急性细菌性心内膜炎、布鲁菌病、厌氧菌血症、真菌血症时,血培养至少连续培养2〜3周,仍无细菌生长者可报告为阴性。阳性结果:三级报告方式:第一级报告告知标本已岀现阳性并报告直接细菌涂片结果,同时做初步药敏试验;第二级是报告初步药敏结果,同时做正式鉴定和药敏试验;第三级报告正式鉴定和药敏试验结果。(五)临床意义葡萄球菌菌血症常由师、痈、脓肿及烧伤创面等原发感染灶继发,也可由呼吸道感染引起。一些革兰阴性杆菌主要侵犯、危及机体免疫功能低下的病人。耐药菌株不断增加。厌氧菌的菌血症常合并需氧菌感染,临床症状较重而复杂。L型菌的菌血症主要由于使用抑制细菌细胞壁合成的抗生素后,由缺损细胞壁的细菌感染

6、所致。免疫低下者常出现真菌菌血症。院内感染菌血症不断上升。三、中枢神经系统感染(一)常见病原菌见表5-34-2表中禺神薛務统酷染常见霹鳳茵痕«算商及朮他乙坐融炎病靈折牛隐球菌卡他某拉鼻柯萨奇病痺念珠茵池刪血幵歯肠钎菌科轴离新脚病as6«-ns狂犬病遵结枝分枝杆01产卑楠M皤斯持菌(二)标本采集用药前,无菌操作腰穿方法采集2〜3ml,盛于无菌试管常温下立即送检。天冷时保温,不可冰箱保存。用于病毒检测时应冷藏送检。(三)检验方法1•涂片镜检:离心3000rpm/min,15分钟。革兰染色(一般细菌)、抗酸染色(分枝杆菌)、墨汁染色(隐球菌)、电镜检查(病毒颗粒)。2.分离培养:5g/L葡萄糖增菌

7、肉泳血平板、中国蓝琼脂平板或麦康凯琼脂平板、巧克力平板。结核菌接种罗-琴培养基或米氏7H10培养基。真菌培养接种沙氏培养基。病毒培养常用动物接种、鸡胚接种、细胞培养。3.血清学检测可直接检测抗原。(四)临床意义细菌性脑膜炎是屮枢神经系统感染的常见类型。真菌性脑膜炎最常见于隐球菌脑膜炎,其他的真菌性脑膜炎如白假丝酵母、球抱子性脑膜炎口渐增多,特别是免疫功能低下和恶性疾病患者易发。流行性乙型脑炎可获得持久免疫力,再次发病者极少见。肠道病毒对中枢神经系统的危害性逐渐引起人们的关注和重视。四、呼吸道感染呼吸道按解剖结构分为上呼吸道和下呼吸道。上呼吸道感染主要指喉及喉以上的呼吸道感染。下呼吸道感染主要

8、指气管、支气管和肺的感染。(一)上呼吸道的正常菌群见表5-34-3*上呼吸通耸证希■醉球浪网慈魔性荀药號凍h傥球Sh廉負球働HlWHh晴血忏繭水師啟WffW(二)常见病原菌见表5-34-4丰兰帕性r就棒携榜薦结復分栈杆跖炭狂纓在淹像惜血託陽1人扬埃嫦菌*見苗划曲:耳嚎杆曲CrUfffiWj怠球苗;曲兔册:底禅浅曲热册汎S轶命呼嘶令睢痴瓠WfftrGmitoSW(三)标本采集(1)±呼吸道常采用鼻咽拭子,用可弯

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