恒磁场对人脐动脉血管平滑肌细胞胞浆游离钙离子浓度的影响

《恒磁场对人脐动脉血管平滑肌细胞胞浆游离钙离子浓度的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、恒磁场对人脐动脉血管平滑肌细胞胞浆游离钙离子浓度的影响：冯旭阳，徐瑞芬，宋博，王海昌【摘要】目的研究恒磁场对培养的人脐动脉血管平滑肌细胞(VSMC)胞浆内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响，探讨恒磁场抑制VSMC增殖的作用机制。方法离体培养人脐动脉VSMC，不同强度的恒磁场垂直作用于VSMC，应用激光共聚焦显微镜观察恒磁场对VSMC胞浆[Ca2+]i的影响。结果5mT的恒磁场作用于VSMC后10-50min[Ca2+]i较对照组明显下降，20min下降最明显；其平滑肌细胞的Ca2+荧光强度明显弱于对照组，至60min

2、接近对照组。结论恒磁场对VSMC胞浆[Ca2+]i有明显降低作用，可能是抑制VSMC细胞增殖的机制。为经皮冠状动脉成型术(PTCA)术后再狭窄的治疗提供了新的理论基础。【关键词】电生理学；游离钙；恒磁场；血管平滑肌细胞(VSMC)　　ABSTRACT:ObjectiveTostudyeffectsofconstantmagicfields(CMF)ontheintracellularfreecalciumofhumanumbilicalarterialvascularsmoothmusclecellstodiscusst

3、hemechanismofCMFaffectingtheproliferationofVSMC.MethodsTheintracellularfreecalciumconcentrationofhumanumbilicalarterialvascularsmoothmusclecellsicrosopy.ResultsTheCMFaffectedtheintracellularfreecalciumconcentrationofhumanumbilicalarterialvascularsmoothmusclecells

4、.TheCMF(5mT)causedapersistentdecreaseofintracellularfreecalciumconcentrationofVSMCfrom10minto50min.ConclusionTheCMFcouldinhibitproliferationofVSMCbydecreasingtheintracellularfreecalciumconstantmagicfieldconcentrationofVSMC.TheCMFcouldmarkedlyinhibitproliferationo

5、fVSMC,ightbeusefulintreatmentofRSafterPTCA.　　KEYC)增殖是经皮冠状动脉成型术(PTCA)后再狭窄的主要病理特征，抑制其增殖是防治PTCA术后再狭窄的重要环节。研究表明适宜强度的恒磁场(constantmagicfield,CMF)对VSMC的增殖有抑制作用[1]，其机理尚不明确。已有报道细胞中的带电离子如钾、钠、氯、钙、镁、磷等，在磁场的作用下，其荷电能力改变,影响离子的移动速度和排列形式,使细胞代谢所需酶的活性或功能受到干扰,影响细胞的增殖能力[2]。本实验采用激光共聚焦

6、显微镜，研究CMF对培养的人脐VSMC内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响，探讨CMF影响VSMC增殖的作用机理。　　1材料与方法　　1.1材料恒磁场购自西北工业大学稀土永磁研究所，平均磁感应强度为5mT，长132mm，宽92mm，厚3-6mm，N极与S极对置，培养板置于两极中间。激光共聚焦显微镜(MRC1024)由美国BIORAD公司生产。Fluo3/Am购自美国BIORAD公司。　　1.2人脐动脉VSMC的培养无菌条件下取胎儿脐带，分离出脐动脉，用镊子剥去动脉外膜，剪成约1mm的小环，种植于培养瓶壁，置于37

7、℃、50mL/LCO2孵箱内2h，待组织块能牢固贴于瓶壁时(约1.5-2h)，加入3mL含有100mL/L新生牛血清、成纤维生长因子(bFGF，5μg/L)和表皮生长因子(EGF10μg/L)的DMEM培养液中，放入CO2孵箱内静置培养。待VSMC生长到一定密度后，用1.25g/L(0.125%)胰蛋白酶消化，机械分散成细胞悬液，传代培养，取其中3-10代作为实验用细胞。　　1.3实验分组对照组：将含100mL/L新生牛血清、bFGF(5μg/L)和EGF(10μg/L)的DMEM的培养液与VSMC的混悬液(细胞浓度为1

8、×105/mL)10μL加入特殊培养皿，设8个复孔。在无磁场作用的状态下在CO2孵箱内静置培养24h。恒磁场组：共分6组，每组设8个复孔。细胞浓度及培养液同对照组，静止培养24h后置于CMF两极之间的培养板分别培养10、20、30、40、50、60min。　　1.4人脐动脉VSMC[Ca2+]i的测定[34]　　1