羊角拗苷对豚鼠心室肌细胞内游离钙离子浓度的影响

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1、中国药理学与毒理学杂志２００７年１０月；２１（５）：３８１－３８４ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ２００７Ｏｃｔ；２１（５）：３８１－３８４·３８１·羊角拗苷对豚鼠心室肌细胞内游离钙离子浓度的影响１１１１１邱奕宁，简珊，彭其斌，戴红梅，龙利红，１２１１王芳，吕家高，姚伟星，陈建国（华中科技大学同济医学院１．药理学系，２．附属同济医院心血管内科，湖北武汉４３００３０）摘要：目的观察羊角拗苷（Ｄｉｖ）对豚鼠心室肌细Ａｒｎ．〕种子中提取，具有强心、消肿的功效。实验表２＋胞内游离钙离子（［Ｃａ］ｉ）浓度的影响，以探讨Ｄｉｖ明它与毒毛花苷Ｋ（ｓｔｒｏｐｈａｎｔｈｉｎＫ）

2、具有相似的作用正性肌力作用的机制。方法Ｆｕｒａ２／ＡＭ荧光探针和疗效，其吸收、排泄、蓄积等药代学特性及不良反标记豚鼠心室肌细胞，应用荧光离子成像系统观察应亦与毒毛花苷Ｋ相似，但毒性较小，有效剂量仅－１２＋［１］－１Ｄｉｖ８００ｎｍｏｌ·Ｌ对心室肌细胞［Ｃａ］ｉ的影响。为毒毛花苷Ｋ的２／３。Ｄｉｖ在低于０．３６５ｍｇ·Ｌ２＋－１结果在正常台氏液中，Ｄｉｖ使心室肌细胞［Ｃａ］ｉ（６８３ｎｍｏｌ·Ｌ）的剂量对离体猫心乳头肌具有剂量２＋依赖性的正性肌力作用［２］。本实验采用荧光离子显著升高（２４３±３６）％，在无钙液中对［Ｃａ］ｉ无明显影响。在无Ｎａ＋、无Ｋ＋台氏液中，Ｄｉｖ使［

3、Ｃａ２＋］成像技术，研究Ｄｉｖ对急性分离的豚鼠心室肌细胞ｉ２＋２＋升高（９６±２０）％。给予Ｌ型钙通道阻滞剂ＣｄＣｌ２内游离Ｃａ浓度（［Ｃａ］ｉ）的影响，以期初步阐明１００μｍｏｌ·Ｌ－１预处理后，Ｄｉｖ仍使［Ｃａ２＋］升高（６３羊角拗苷的正性肌力作用机制。ｉ±１０）％。给予Ｔ型钙通道阻滞剂ＮｉＣｌ２４０μｍｏｌ·Ｌ－１预处理后，Ｄｉｖ引起的［Ｃａ２＋］升高基本被阻断。１材料和方法ｉ－１结论体外应用Ｄｉｖ８００ｎｍｏｌ·Ｌ时使豚鼠心室肌１．１动物２＋２＋细胞［Ｃａ］ｉ升高，该升高作用依赖于细胞外Ｃａ健康成年豚鼠，雌雄不拘，体重２５０～３００ｇ，由的存在，可能主要由Ｔ型钙通道

4、介导，Ｌ型钙通道和华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。＋２＋ＮａＣａ交换蛋白亦参与其中。其正性肌力作用１．２仪器与药品２＋与心室肌细胞［Ｃａ］ｉ升高有关。羊角拗苷，相对分子质量５３４．６７，熔点２２１～关键词：羊角拗苷；心肌；钙，细胞内２２６℃，纯度＞９５％，由同济医学院药理学系提供；蛋中图分类号：Ｒ２８５，Ｒ９７２白酶Ｅ为Ｍｅｒｃｋ公司产品；ＣｄＣｌ２、ＮｉＣｌ２、ＴｒｉｓＨＣｌ、文献标识码：ＡＦｕｒａ２／ＡＭ、ＤＭＳＯ、胶原酶Ⅰ、牛血清白蛋白、ＨＥＰＥＳ文章编号：１０００３００２（２００７）０５０３８１０４均购自Ｓｉｇｍａ公司；其余试剂为国产分析纯。Ｆｕ

5、ｒａ２荧光测钙系统（Ｔ．Ｉ．Ｌ．ＬＰｈｏｔｏｎｉｃｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。羊角拗苷（ｄｉｖａｒｉｃｏｓｉｄｅ，Ｄｉｖ）是从夹竹桃科植物１．３豚鼠心室肌细胞的分离－１羊角拗〔Ｓｔｒｏｐｈａｎｔｈｕｓｄｉｖａｒｉｃａｔｕｓ（Ｌｏｕｒ．）Ｈｏｏｋ．ｅｔ豚鼠腹腔注射２０％乌拉坦（１．０～１．２ｇ·ｋｇ）麻醉，气管插管，肝素抗凝，行主动脉插管，游离心收稿日期：２００６０９１４接受日期：２００７０５１９脏，固定于Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ装置上恒温灌流（３７℃，１０－１－１基金项目：国家自然科学基金资助项目（３０５７０５５６）；教ｍＬ·ｍｉｎ，通１００％Ｏ２）。先以台氏液（ｍｍｏｌ

6、·Ｌ：育部优秀青年教师资助计划（２００３）；武汉市青年科技晨光ＮａＣｌ１３５，ＫＣｌ５．４，ＭｇＣｌ２·６Ｈ２Ｏ１，ＣａＣｌ２１．８，计划（２００４５００６０７１１１）ＮａＨ２ＰＯ４·２Ｈ２Ｏ０．３，ＨＥＰＥＳ１０，葡萄糖１０，ｐＨ作者简介：邱奕宁（１９８２－），女，福建龙岩人，临床医学７．３），再以无钙液（不加ＣａＣｌ２，其余成分同台式液）７年制学生。－１灌流后，以含胶原酶Ⅰ０．２３ｇ·Ｌ，牛血清白蛋白联系作者陈建国Ｅｍａｉｌ：ｃｈｅｎｊ＠ｍａｉｌｓ．ｔｊｍｕ．ｅｄｕ．－１－１０．５ｇ·Ｌ，蛋白酶Ｅ０．１２ｇ·Ｌ的无钙液循环灌流ｃｎＴｅｌ：（０２７）８３６９２６３６

7、Ｆａｘ：（０２７）８３６９２６０８；王芳Ｅｍａｉｌ：ｗａｎｇｆａｎｇ０３２２＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎＴｅｌ：（０２７）８３６９１７６０９～１０ｍｉｎ，再用无钙液灌流３ｍｉｎ终止酶解反应，剪－１Ｆａｘ：（０２７）８３６９２６０８碎心室肌，置于低钙台氏液（０．２ｍｍｏｌ·ＬＣａＣｌ２）·３８２·ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ２００７Ｏｃｔ；２１（５）２＋中孵育３０～４０ｍｉｎ，上清液过滤，即得到分离的单个２．４ＣｄＣｌ２对Ｄｉｖ引起的［Ｃａ］ｉ升高的影响心室肌细胞，室温下静置１～２ｈ后用于实验。在台氏液