细胞内游离钙离子测定方法

《细胞内游离钙离子测定方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、食品与药品FoodandDrug2006年第8卷第12A期25细胞内游离钙离子的测定方法郭琼杰1，*孙淑娟2*（1．山东大学药学院，山东济南250012；2．山东省千佛山医院，山东济南250014）摘要：细胞内游离钙离子与信号转导以及细胞的各种生理病理现象密切相关，因此检测细胞内游离钙离子具有非常重要的意义。其测定方法随着近年来仪器与技术的进步而有了长足的发展，包括电极法、同位素示踪法、核磁共振法、高流通量测定法、离子指示剂法等，本文主要介绍这些方法的特点和应用情况。关键词：细胞内钙离子；测定方法；综述中图分类号：Q582文献标识码：A文章编号：1672-979

2、X(2006)12-0025-03DevelopmentofAssayMethodforIntracellularFreeCalciumGUOQiong-jie1,SUNShu-juan2*(1.SchoolofPharmaceuticalSciences,ShandongUniversity,Jinan250012,China；2.QianfoshanHospitalofShandongProvince，Jinan250014,China)Abstract：Thecalciumionisoneofthemostimportantuniversalsignali

3、ngmolecules,regulatingalmostallknowncellularfunctionsandprocesses.Thechangeofintracellularfreecalciumconcentrationiscloselycorrelatedwithsignaltransductionandkindsofcellularpathophysiologicalphenomena.Therefore,themeasurementofintracellu-larfreecalciumisverymeaningful.Inthisarticle,w

4、ereviewthemethodsandtechniquesforintracellularfreecalciumdetermination,includingelectrodemethod,isotopetracermethod,NMRmethod,high-throughoutmethod,ionindicatormethodandsoon.Thefeatureandapplicationsofeachmethodarealsodiscussed.Keywords：intracellularcalciumion;assaymethod;review钙离子（C

5、a2+）是已知最通用的细胞内信使之电势差（V）符合V=28log(C/Cr)的Nernst方一，几乎可以调控所有细胞功能。细胞内Ca2+浓度程。Ca2+选择性电极的动态范围比荧光指示剂宽，的改变，通过不同的信号通路、细胞器以及跨细胞但对游离Ca2+改变的反应时间（约0.5～1s）比荧Ca2+依赖过程的幅度和周期来调节细胞过程[1]。实际光指示剂慢[4]。该方法能直接测定细胞内Ca2+浓上，Ca2+几乎在所有生物的细胞过程中都起着主要度，连续提供活细胞内Ca2+的动态变化信息，但是的协调作用[2]。只有游离钙才能在细胞内发挥其生物电极穿刺不适合太小的细胞。离子选择

6、性微电极作活性，要准确分析钙在生命活动中的作用，就必须为一种快速、方便和相对便宜的方法，目前多用于准确地测量细胞内钙浓度的瞬时动态变化[3]。近年植物组织及细胞内Ca2+测定[5]。来，细胞内Ca2+的测定技术在国内外发展迅速，本2同位素示踪法文就这一方面加以总结。对Ca2+利用放射性核素45Ca2+进行示踪，可测1电极法量出通过细胞膜转运到细胞内Ca2+增加的速度及浓度Ca2+选择性电极是通过电势来测定Ca2+的浓度，大小，揭示钙离子通道和钙离子泵的作用，目前主将离子络合剂掺入液态的亲脂膜，使膜自身可选择要用于测定跨膜Ca2+流动[6]，静息状态的测定效果不性

7、的从水溶液中提取离子，并加以转移，产生与浓理想。放射性同位素作为示踪剂可以检测1.0×l0-18～度差成比例的膜电势。在没有其它离子干扰的情况1.0×10-19的放射性核素，比普通化学分析法的灵敏下，未知离子浓度（C）和参比浓度（Cr）间的度10-12g要高得多，确定放射性示踪剂在组织器官收稿日期：2006-10-09作者简介：郭琼杰（1982-），女，河北秦皇岛人，硕士研究生，药学专业*通讯作者：孙淑娟，女，硕士生导师，Tel:0531-82968900-2366，E-mail:sunshujuan888@163.com26食品与药品FoodandDrug20

8、06年第8卷第12A期中