细胞外钙受体调节人脐静脉内皮细胞游离钙离子浓度的研究

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1、第28卷第4期石河子大学学报(自然科学版)Vol_28NO．42010年8月JournalofShiheziUniversity(NaturalScience)Aug．2010文章编号：1007—7383(2010l04—0453—04细胞外钙受体调节人脐静脉内皮细胞游离钙离子浓度的研究陈雄英，王振焕，胡清华，钟华，邓峰美，何芳(1石河子大学医学院／新疆地方与民族高发病重点实验室，石河子8320022华中科技大学同济医学院／卫生部呼吸系统疾病重点实验室，武汉430030)摘要：为探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)游离钙离子浓度是否受细胞外钙受体(CaR)的调节。采用Wes

2、ternblot及RT-PCR技术检测CaR在HUVEC中蛋白及mRNA表达。使用CaR激动剂精胺，负性变构调节剂Calhex231，通过钙荧光探针(Fura一2／AM)负载HUVEC检测细胞内钙离子浓度([Ca]i)。结果显示：(1)HUVEC中有CaR的表达。(2)在Fura—g／AM负载HUVEC中加入精胺刺激，[Ca]为z~ratio=0．24±0．Ol，先加入Calhex231作用lmin后再加入Calhex231+精胺刺激，[Ca]；为△ratio=0，两组比较差异有统计学意义(P(0．05)。由此可知，CaR调节HuVEC游离钙离子浓度。关键词：细胞外钙受体

3、；Calhex231；细胞内钙离子浓度中图分类号：R363．272文献标识码：AExtracellularCa。sensingReceptorRegulatingIntracellularCa+C0ncentrati0ninHumanUmbilicalVeinEndothelialCellsCHENXiongying，WANGZhenghuang，HUQinghua。，ZNONGHua，DENGFengmei。HEFang(1MedicalCollege，ShiheziUniversity／MinistryofEducationKeyLaboratoryofXinjian

4、gEndemicandEthnicDiseases，Shihezi832002，China；2TongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechno1ogy／KeyLaboratoryofPulmonaryDiseaseofMinistryofHealthofChina，Wuhan430030，China)Abstract：TostudywhetherintracellularCa抖concentration([Ca]i)isregulatedbyCa—sensingreceptor(CAR)inhumanumb

5、ilicalveinendothelialcells(HUVEC)．CaRproteinwasdemonstratedbyWesternblot．ThemRNAexpressionofCaRwasinvestigatedbyRT—PCRinHUVEC．ThefluorescenceCa。indi—catorFura一2／AMwasusedtoobserveECa。]jinthepresenceofCaRagonistsspermineandnegativeal—lostericmodulatorCalhex231．(1)CaRispresentinHUVEC．(2)The

6、rewassignificantlydifferencein[Ca外]jbetweenspermine(△ratio=：=0．24±0．01)andCalhex231+spermine(△ratio===0)(P<0．05)．CaRregulates[Ca。]iinHUVEC．Keywords：calcium—sensingreceptor；Calhex231；intracellularCaconcentration钙离子作为金属离子并不象其它大分子可被表首先达到或维持一定浓度，而且在细胞内外维持～达和降解，其无论在细胞内或细胞外执行功能必须定的浓度差。细胞内钙离子浓度可

7、由各种信号分收稿日期：2009-10-11基金项目：国家自然科学基金项目(30860099)作者简介：陈雄英(1983一)，女，硕士生，专业方向为心血管病理生理研究。通讯作者：何芳(1964一)，女，教授，从事心血管病理生理研究；e-mail：FangF2002shz@126．corn。454石河子大学学报(自然科学版)第28卷子、钙泵及钙离子通道等多种因素精确调控。其中法培养HUVEC。胰蛋白酶注入脐静脉内，室温消包括由细胞外钙受体(TheextracellularCa—sensing化10min后，1OFBS的M199培养