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《比色法测定葡萄皮和葡萄籽中原花青素的含量》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、1228中国公共卫生2003年第19卷第10期ChinJPublicHealth2003Vol.19No.10文章编号:100120580(2003)1021228202中图分类号:R151文献标识码:A【实验研究】比色法测定葡萄皮和葡萄籽中原花青素的含量向阳,马龙,苏德奇原花青素(Procyanidins)是植物中广泛存在的一大类多酚化合物的总称。这类化合物是由不同数量的儿茶素或表儿茶素结合而成,在酸性溶液中加热可降解和氧化形成花色素(Bate-Smith反应)〔1,2〕。研究表明,葡萄原花青素主要存在于葡萄籽和皮中,具有抗氧化、保护心血管和预防高血压、
2、抗肿瘤、抗辐射、抗突变等作用〔3,4〕。新疆盛产葡萄,具有丰富的葡萄资源优势。本文用比色法对新疆部分葡萄品种的葡萄皮和葡萄籽进行了原花青素含量测定,以期为新疆的葡萄资源开发利用提供实验理论依据。1材料与方法111材料不同品种的新鲜葡萄;葡萄酒厂废渣:采自新疆某葡萄酒厂。仪器与试剂:721分光光度计,水浴锅,回流装置,干烤箱;儿茶素标准品(购于美国SIGMA公司),香草醛,乙醇,甲醇等。112方法〔5〕11211样品溶液的制备1121111样品处理不同品种的新鲜葡萄采用人工的方法剥离出葡萄皮和葡萄籽,自然干燥,备用。葡萄酒厂废渣,干燥后将籽和皮分离,备用。11
3、21112样品溶液的制备葡萄皮样品溶液:葡萄皮样品干3191%。日间差:将日内差样品溶液,每隔1d测定1次,连续测定5d,吸光度值分别为11100,11140,11095,11097,11139,平均吸光度值为11114,RSD%=2108%。213回收率实验精密称取011000g同一品种葡萄籽粗粉(红克里米斯克),共9份,低、中、高浓度各3份,分别加入1mg/ml儿茶素标准溶液410,415,510ml,按样品制备方法制成测定液,分别精密吸取015ml按标准曲线项下进行操作。测定回收率为95101%～105121%,平均回收率为98189%,RSD%=3
4、197%。214样品测定将定容好的样品溶液以16000r/min的速度离心30min,分别吸取上清液015ml,按标准曲线项下操作,测定吸光度,代入标准曲线方程中计算含量(表1)。由表1可知,葡萄籽中原花青素含量>葡萄皮中原花青素含量。葡萄皮中原花青素含量较高的有:巨峰、红地球、秋黑,而酿酒后的葡萄皮渣皮中原花青素含量较低;葡萄籽中原花青素含量较高的有秋黑、扎娜、和田红;酿酒后的葡萄皮渣籽中,葡萄皮废渣A中的原花青素含量较高。因此,葡萄籽是原花青素的良好来源。表1不同品种葡萄皮和籽中PC的含量(¯x±s,n=3)PC的含量(g/100g)燥至恒重,粉碎,过8
5、0目筛。精密称取粉末110000g,分别置于100ml平底烧瓶中,加60%乙醇溶液50ml,在沸水浴中回编号品种皮籽流提取2次,每次30min,合并提取液。同时,在沸水浴中将提取液通过减压真空泵回收乙醇,水相用水定容至100ml,摇匀,备用。葡萄籽样品溶液:葡萄籽样品干燥至恒重,粉碎成粗粉。精密称取粉末015000g,其余同上。11212标准溶液的制备精密称取儿茶素标准品011000g,加热溶解,用蒸馏水定容至100ml,配制成浓度为1mg/ml的标准溶液。2结果与分析211标准曲线制备分别精密吸取110mg/ml的儿茶素标准溶液015,110,210,4
6、10,810ml于2510ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,制成浓度为0102,0104,0108,0116,0132mg/ml的标准系列,再分别吸取015ml不同浓度的标准溶液于10ml比色管(外包铝箔)中,加入3ml4%香草醛甲醇溶液,115ml浓盐酸,混匀,在20℃水浴锅中放置15min后,用纯水作参比于500nm处测定吸光度。以浓度对吸光度回归,得标准曲线方程为:y=010255x+414378,r=019988。结果表明,浓度在0102～0132mg/ml范围内呈良好的线形关系。212精密度实验日内差:取同一品种葡萄籽粗粉(黑奥林)015000g,
7、按样品制备方法制成测定液,在1d内,每隔1h测定1次,共测定6次。吸光度分别为11100,11105,01998,11098,11101,11104,平均吸光度值为11084,RSD%=作者单位:新疆医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,乌鲁木齐830054作者简介:向阳(1966-),女,河南人,主管检验技师,硕士,研究方向:新疆特有药食兼用植物的开发应用。1扎娜2119±010612108±01372里扎马特1109±010410133±01273和田红2147±010511138±01344巨峰>7101±01148184±01315红地球>7102
8、±011110124±01206克里米斯克(红)61
