葡萄籽原花青素含量测定.pdf

《葡萄籽原花青素含量测定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第30卷第1期Vol.30No.12007年01月Jan.2007葡萄籽原花青素含量测定11121赵平,宋学娟,张月萍,贾宏海,于国强(1.河北科技大学化学与制药工程学院，河北石家庄050018；2.张家口华源葡萄酒有限公司技术科，河北张家口075600)[摘要]酸性条件下，原花青素与香草醛反应生成红色产物，由红色产物的吸光度可确定原花青素的含量。实验首先考察了酸对显色的影响，确定以较低浓度的硫酸作催化剂。在此基础上，进一步考察了其他因素的影响，确立了稳定的比色条件：硫酸30%、香草醛4%、反应温度30℃、反应时间

2、15min，并得出了标准曲线。[关键词]香草醛；葡萄籽；原花青素[中图分类号]R284.2[文献标识码]A[文章编号]1003-5095(2007）01-0046-03原花青素为植物多酚类天然抗氧化剂，由不同数浴锅（龙口市电炉制造厂）。量的单体黄烷-3-醇缩合而成，这类化合物因在酸性原花青素标准品（天津尖峰天然产物研究开发公条件下加热生成花青素而被命名为原花青素。原花青司，纯度≥95%）；儿茶素标准品（美国Sigma公司，纯素具有极强的抗氧化性，清除自由基和抑制脂质过氧度≥98%）；香草醛（天津光复精细化工研究所，

3、分析化的能力，其抗氧化效果约为VE的50倍，VC的20纯）；甲醇、硫酸、盐酸均为分析纯；实验用水为去离子倍，是目前发现的最强有效的氧自由基消除剂和脂质水。过氧化抑制剂之一。原花青素单体按不同聚合度形成1.2实验方法聚合体，因构象或键合位置不同，单体又有多种异构首先扫描出反应体系的最大吸收波长，然后考察体，要测定每一成分的含量极为困难。目前国际上还酸的影响，确定反应的催化剂。在此基础上，考察其他没有统一的原花青素检测方法，其定量分析常用比色因素的影响，确定比色条件。在最佳比色条件下，测定法，应用较多的是香草醛法，该方

4、法的原理（图1）基原花青素及其单体儿茶素的标准曲线，作为检测原花于原花青素A环化学活性较高[1]，其上的羟基可与香青素含量的依据。草醛发生酚醛缩合反应，在浓酸作用下形成有色的正1.2.1配制试剂碳离子，据此正碳离子的吸光度可测定原花青素的含（1）配制样品溶液称取一定量的原花青素标准量。盐酸或硫酸均可作为反应过程的催化剂。品，用蒸馏水定容至一定体积，配成浓度为0.01－0.5mg/mL的原花青素标准品水溶液。（2）配制显色剂试剂（A香草醛－甲醇溶液）：称取一定量的香草醛，分别用甲醇定容至一定体积，配成浓度为0.5%、

5、1%、2%、3%、4%、5（%W/V）的香草醛－甲醇溶液；试剂（B浓盐酸－甲醇溶液）：量取一定体图1酚醛缩合反应机理积的浓盐酸，分别用甲醇定容至一定体积，配成浓度该反应的灵敏度与酸浓度有关[2]，具体效果尚无为15%、30%、45（%V/V）的浓盐酸－甲醇溶液；试剂C定论。本文将重点考察酸对显色的影响，选择合适的（浓硫酸－甲醇溶液）：量取一定体积的浓硫酸，分别酸作为催化剂。再综合分析其他影响因素，确定合理用甲醇定容至一定体积，配成浓度为20%、30%、40%的比色条件，最终做出标准曲线。（V/V）的浓硫酸－甲醇溶液

6、。1实验部分显色剂的配制采用一定浓度的A与B混合或A1.1仪器和试剂与C混合。UV-2501PC型分光光度计（日本岛津）；恒温水1.2.2确定最大吸收波长[收稿日期]2006-11-27取适量的标准品溶液，与显色剂反应后，以无水[作者简介]赵平（1965-），男，教授，博士，研究方向为化工甲醇作参比，在可见光区扫描，测定最大吸收波长。分离及生物分离。1.2.3酸的选择第1期赵平等：葡萄籽原花青素含量测定·47·两种显色剂分别与不同浓度的样品溶液反应，测化，逐渐由红色变为蓝色。这是因为浓硫酸具有强氧定体系在最大吸收波

7、长下的吸光度。化性，当浓度较高时，氧化性更为显著，使香草醛发生1.2.4了自缩合反应，生成了绿色产物[3]比色条件的确定，从而使体系颜色以硫酸浓度，香草醛浓度，反应温度和反应时间改变。综上所述，盐酸只有低浓度时灵敏度稍高，其他为考察因素，设计一个4因素3水平的正交实验（L34）确定方面均逊于硫酸，但考虑到高浓度的硫酸会导致副反9比色条件。应发生，影响检测结果，本实验最终选择较低浓度的1.2.5可靠性检验硫酸作为催化剂。重复性实验：为了验证实验结果是否可靠，在最2.3比色条件确定（34）水平因素佳比色条件下，分别采用

8、两种酸作催化剂，重复测定表1原花青素正交实验L94次。水平H2SO4浓度/%香草醛浓度/%反应温度/℃反应时间/min1203205稳定性实验：为了检验比色条件的稳定性，在最23043010佳条件下，分别采用两种酸作催化剂，每隔一定时间34054015测定其吸光度，连续测定1h。表2正交实验方案及结果1.2.6标准曲线绘制序号H2SO4浓度香草醛浓度反应温度