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1、2008年第20期食品安全与检测中国酿造总第197期·77·改进的DPPH·法测定葡萄籽原花青素抗氧化能力研究吴朝霞,王媛,张琦,孙希云(沈阳农业大学食品学院,辽宁沈阳110161)摘要:采用改进的DPPH·法,引用一个新参数—自由基清除能力AE(Antiradicalefficiency)来测定葡萄籽原花青素抗氧化、清除自由基能力。它包含DPPH·原始质量浓度减少至50%(稳定态)时葡萄籽原花青素的添加量(EC50)及达到该状态的时间(TEC50)2个因素。结果表明:在梯度洗脱中,随着乙醇浓度的提高,产物抗氧化、清除自由基的能力也相应
2、地提高。GSP(葡萄籽原花青素粗提物)、GSP1(纯化2424242424物1)、GSP2(纯化物2)、GSP3(纯化物3)、GSP4(纯化物4)、VC、芦丁的AE分别为516×10、616×10、719×10、918×10、1115×10、24246816×10、114×10。关键词:葡萄籽原花青素;DPPH·;AE;抗氧化中图分类号:TS20213;R15113文献标识码:A文章编号:0254-5071(2008)20-0077-02Studyonantioxidantefficiencyofgrapeseedproanthocya
3、nidinbythemodifiedDPPH·methodWUZhaoxia,WANGYuan,ZHANGQi,SUNXiyun(FoodScienceCollegeofShenyangAgriculutureUniversity,Shenyang110161,China)Abstract:TheefficiencyofantioxidantandantiradicaloftheproanthocyanidinextractedfromgrapeseedwasdeterminedbymodifiedDPPH·assay1Itdepend
4、edontheintroductionofanewparameter2antiradicalefficiency(AE),whichincludedtwofactors50%theinitialDPPH·concentration(EC50)andthetimetoreachthesteadystatetoEC50concentration(TEC50)1Theresultshowedthattheefficiencyincreasedwiththepurifieddegreeofthepro2anthocyanidinfromgrap
5、eseedduringthegradientelution1Theantiradicalefficiency(AE)oftheGSP(proanthocyanidinextextractedfromgrapeseed),24242424242424GSP1,GSP2,GSP3,GSP4,VCandrutinwere516×10,616×10,719×10,918×10,1115×10,6816×10,114×10respectively1Keywords:grapeseed;proanthocyanidin;DPPH·;AE;antio
6、xidantactivity自由基引发的脂质过氧化不仅是食品风味和营养品质称取100g干燥脱脂葡萄籽粉,用70%vol的乙醇溶液,料变劣的一个重要原因,许多病理、生理现象(如衰老、肿瘤及液比1∶7,50℃提取2次合并提取液,离心过滤,得澄清的滤炎症等)也与生物大分子的氧化损伤有关。原花色素是一液。滤液在40℃以下减压浓缩,真空干燥,得葡萄籽原花青种氧自由基的清除剂和脂质过氧化抑制剂,能够有效地清素粗粉(proanthocyanidinextractedfromgrapeseed’sextracts,除超氧阴离子自由基、羟基自由基,减少脂
7、质过氧化自由简称GSP)。称取一定量粗提物,配置成一定浓度,过滤,用基、抑制脂质过氧化等。天然产物的抗氧化性测定方法很HPD600大孔吸附树脂柱进行吸附,用去离子水洗脱蛋白、糖多,DPPH·法是常用的方法之一。传统的DPPH·法采用半等杂物后,依次用20%vol、40%vol、60%vol、80%vol的乙醇洗抑制剂量EC50来比较抗氧化能力的大小。本实验在传统脱,将洗脱液真空浓缩并干燥,分别得到葡萄籽原花青素纯DPPH·法基础上,引入了达到该状态的时间(TEC50)参数,以化物1、2、3、4干粉(简称GSP1、GSP2、GSP3、GS
8、P4)。新参数2自由基清除能力AE(Antiradicalefficiency)研究葡11212自由基残留率的测定方法萄籽原花青素纯化片段抗氧化能力的差异,从而更加准确以甲醇为溶剂,配制不同浓度的葡萄籽原花