酶法辅助超声波法提取类球红细菌SOD工艺研究.pdf

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1、沈阳农业大学学报,2014—02,45(1):47—51JournalofShenyangAgriculturalUniversity,2014—02,45(1):47—51酶法辅助超声波法提取类球红细菌SOD工艺研究李祖明,霍笑靓,高丽萍,惠伯棣,杨卫东,王栋2白志辉。(1.北京联合大学应用文理学院,北京100191;2.北京天维新探生物科技有限公司,北京100176;3.中国科学院生态环境研究中心,北京100085)摘要:为了研究类球红细菌SOD的提取工艺,采用研磨法、超声波法、冻融辅助超声波法和酶法辅助超声波法提取类球红细菌超

2、氧化物歧化酶,结果表明:酶法辅助超声波法是较优的提取方法。对类球红细菌SOD的提取工艺进行单因素和正交试验,得到较优的提取工艺参数为:超声波输出功率500W,超声波工作总时间15rain,固液比1:15,酶添加量3001~L,酶解温度40℃,酶解pH值7,酶解时间60min。在此较优提取工艺参数下,类球红细菌SOD活性达到385.7U·mL~,较优化前提高40%。关键词:类球红细菌;超氧化物歧化酶(SOD);酶法辅助超声波法;正交试验DOI:10.3969/j.issn.1000-1700.2014.01.011中图分类号:TS20

3、1文献标识码:A文章编号:1O00—1700(2014)01—0047—05OptimizationofUltrasonicAssistedwithZymolysisExtractionTechniqueofSODfromRhodobactersphaeroidesLIZu-ming,HUOXiao—liang,GAOLi-ping,HUIBo-di,YANGWei-dong,WANGdong,BAIZhi—hui(1.CollegeofArtsandSciences,BeijingUnionUniversity,Beijing10

4、0191,China;2.BeijingTianweixintanBiotechnologyCompanyLtd.,Beijing100176,China;3.TheResearchCenterforEeo--EnviromentalSciences,ChineseAcademyofSciences,Beijing100085)Abstract:ExtractiontechniqueofSODfromRhodobactersphaeroideswasstudiedbyultrasonicassistedwithzymolysis.B

5、ycomparisionwithgrinding,ultrasonicandultrasonicassistedwithfreezing—thawing,ultrasonicassistedwithzymolysiswastheoptimumextractionmethodforsuperoxidedismutase(SOD)fromRhodobactersphaeroides3757.Resultsofbothsinglefactorexperimentandorthogonaltestshowedthattheoptimumul

6、trasonicassistedwithzymolysisextractionconditionsofSODwereasfollows:ultrasonicpower500W,ultrasonictotalworkingtime15min,material/liquidratio1:15,amountofenzyme300txL,temperatureofzymoIysis40℃,pHofzymoIysis7,timeofzymoIysis60min.Undertheseoptimumconditions,activitiesofS

7、ODwas385.7U·mL-,andtheextractionratewouldbeimprovedby40%.Keywords:Rhodobactersphaeroides;superoxidedismutase;ultrasonicassistedwithzymolysis;orthogonaltest超氧化物歧化酶(SOD)是广泛存在于生物体内的一类金属酶,它能催化超氧阴离子自由基发生歧化反应,从而能有效清除机体内超氧阴离子自由基,是生物体重要的细胞防御系统之一,有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗辐射和消炎作用IlJ。SOD已被开

8、发成药品、饮料、保健品、化妆品等的添加剂;细菌SOD的提取常被应用于医学领域、食品领域和化妆品领域中l2l。目前,人们已从猪、牛、马等动物红细胞、肌肉、肝脏组织以及植物和微生物中分离纯化出SOD;其中利用微生物生产SOD具有成本低、周

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