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时间:2019-07-22
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1、第7章生物催化剂—酶Enzymes羧肽酶本章主要内容酶的一般概念酶的组成与维生素酶的结构与功能的关系酶的催化机理酶反应的动力学酶活性的调节1.酶的概述酶是生物催化剂。绝大部分酶是蛋白质,还有一些核糖核酸RNA具有催化作用,称为核酶(ribozyme)。1.1定义细胞的代谢由成千上万的化学反应组成,几乎所有的反应都是由酶(enzyme)催化的。酶对于动物机体的生理活动有重要意义,不可或缺。酶在生产实践中有广泛应用。1.2酶的命名(1)习惯命名——依据所催化的底物(substrate)、反应的性质、酶的来源等命名。例如,胃蛋白(水解)酶、碱性磷酸酶。(2)系统命名——根据底物与反应性质
2、命名反应:葡萄糖+ATP葡萄糖-6-磷酸+ADP命名:葡萄糖:ATP磷酰基转移酶(习惯名称,葡萄糖激酶)1.3酶的分类氧化还原酶AH2+BA+BH2转移酶Ax+CA+Cx水解酶AB+H2OAH+BOH裂解酶AB+C异构酶AB合成酶A+BC,需要ATP1961年酶学委员会(EnzymeCommission,EC)规定酶的表示法:EC.X.X.X.X例如:乳酸脱氢酶1.4酶活性(enzymeactivity)酶活性的表示方法:酶活性指的是酶的催化能力,用反应速度来衡量,即单位时间里产物的增加或底物的减少。V=dP/dt=-dS/dt测定方法:吸光度测定、气体分析、电化学分析等。酶活性的
3、计量:EC1961年规定:在指定的条件下,1分钟内,将1微摩尔的底物转变为产物所需要的酶量为1个酶活国际单位(IU)。比活性(specificityofenzyme)指的是每毫克酶蛋白所具有的酶活性单位数。比活性=活性单位数/酶蛋白重量(mg)比活性反映了酶的纯度与质量。酶促反应的速度曲线随着酶催化的反应进行,反应速度会变慢,这是由于产物的反馈作用、酶的热变性或副反应引起的。但是,在反应起始不久,在酶促反应的速度曲线上通常可以看见一段斜率不变的部分,这就是初速度。在酶的动力学研究中,一般使用初速度的(V0)概念。高效性酶的催化作用可使反应速度比非催化反应提高108-1020倍。比其
4、他催化反应高106-1013倍例如:过氧化氢分解2H2O22H2O+O2Fe3+催化,效率为6×104mol/mol.s过氧化氢酶催化,效率为6×106mol/mol.s专一性即对底物的选择性或特异性。一种酶只催化一种或一类底物转变成相应的产物。1.5酶的特点绝对专一性一种酶只催化一种底物转变为相应的产物。例如,脲酶只催化尿素水解成CO2和NH3。相对专一性一种酶作用于一类化合物或一类化学键。例如,不同的蛋白水解酶对于所水解的肽键两侧的基团有不同的要求。立体专一性指酶对其所催化底物的立体构型有特定的要求。例如,乳酸脱氢酶专一地催化L-乳酸转变为丙酮酸,延胡索酸只作用于反式的延胡索酸
5、(反丁烯二酸)。立体专一性保证了反应的定向进行。R1:Lys,ArgR2:不是ProR3:Tyr,Trp,PheR4:不是Pro酶容易变性这是酶的化学本质(蛋白质)所决定的。酶的可调节性抑制和激活(activationandinhibition)反馈控制(feedback)酶原激活(activationofproenzyme)变构酶(allostericenzyme)化学修饰(chemicalmodification)多酶复合体(multienzymecomplex)酶在细胞中的区室化(enzymecompartmentalization)已知的上千种酶绝大部分是蛋白质单纯酶:少数
6、,例如:溶菌酶(催化水解细菌多糖细胞壁)结合酶:大多数结合酶=酶蛋白+辅因子辅因子包括:辅酶、辅基和金属离子。2.酶的组成与维生素2.1酶的化学本质酶蛋白的作用:与特定的底物结合,决定反应的专一性。辅酶、辅基的作用:参与电子的传递、基团的转移等,决定了酶所催化反应的性质。有十几种.辅酶与辅基的异同点:它们都是耐热的有机小分子,结构上常与维生素和核苷酸有关。但是辅酶与酶蛋白结合不紧,容易经透析除去,而辅基通常与酶蛋白共价相连。金属离子的作用:它们是酶和底物联系的“桥梁”;稳定酶蛋白的构象;酶的“活性中心”的部分。结合酶举例,()内为辅因子:乳酸脱氢酶(辅酶I,NAD)异柠檬酸脱氢酶(
7、辅酶I,NAD)醇脱氢酶(辅酶I,NAD)葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(辅酶II,NADP)琥珀酸脱氢酶(FAD)乙酰辅酶A羧化酶(生物素,ATP,Mg++)脂酰辅酶A合成酶(辅酶A,CoA)维生素(Vitamin)是动物和人类生理活动所必需的,从食物中获得的一类有机小分子。它们并不是机体的能量来源,也不是结构成分,大多数以辅酶、辅基的形式参与调节代谢活动。脂溶性维生素:A视黄醇(维生素A原——胡萝卜素)D钙化醇E生育酚K凝血维生素水溶性维生素:B族维生素和维生素C(以下主
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