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时间:2020-09-13
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1、第7章生物催化剂—酶Enzymes羧肽酶本章主要内容酶的一般概念酶的组成与维生素酶的结构与功能的关系酶的催化机理酶反应的动力学酶活性的调节1.酶的概述酶是生物催化剂。绝大部分酶是蛋白质,还有一些核糖核酸RNA具有催化作用,称为核酶(ribozyme)。1.1定义细胞的代谢由成千上万的化学反应组成,几乎所有的反应都是由酶(enzyme)催化的。酶对于动物机体的生理活动有重要意义,不可或缺。酶在生产实践中有广泛应用。1.2酶的命名(1)习惯命名——依据所催化的底物(substrate)、反应的性质、酶的来源等命名。例如,胃蛋白(水解)酶、碱性磷酸
2、酶。(2)系统命名——根据底物与反应性质命名反应:葡萄糖+ATP葡萄糖-6-磷酸+ADP命名:葡萄糖:ATP磷酰基转移酶(习惯名称,葡萄糖激酶)1961年国际酶学委员会(EnzymeCommittee,EC)根据酶所催化的反应类型和机理,把酶分成6大类:1.氧化还原酶类:主要是催化氢的转移或电子传递的氧化还原反应。AH2+B(O2)A+BH2(H2O2,H2O)(1)脱氢酶类:催化直接从底物上脱氢的反应。AH2+BA+BH2(需辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ)1.3酶的分类(2)氧化酶类①催化底物脱氢,氧化生成H2O2:AH2+O2A+H2O2(需FAD或F
3、MN)②催化底物脱氢,氧化生成H2O:2AH2+O22A+2H2O(3)过氧化物酶ROO+H2O2RO+H2O+O2(4)加氧酶(双加氧酶和单加氧酶)O2+OHOHC=OC=OOHOH(顺,顺-已二烯二酸)RH+O2+还原型辅助因子ROH+H2O+氧化型辅助因子(又称羟化酶)2.转移酶类:催化化合物中某些基团的转移。A·X+BA+B·X根据X分成8个亚类:转移碳基、酮基或醛基、酰基、糖基、烃基、含氮基、含磷基和含硫基的酶。3.水解酶类:催化加水分解作用。AB+H2OAOH+BH4.裂解酶类:催化非水解性地除去基团而形成双键的反应或逆反应。CH
4、3C=OCOOHC—C键CH3C=OH+CO2C—O键CH2COOHHO—CH—COOHHCCOOHHOOCCH+H2OC—N键COOHCH—NH2CH2COOHCOOHCHHCCOOH+NH35.异构酶:催化各种异构体之间的互变。AB常见的有消旋和变旋、醛酮异构、顺反异构和变位酶类。6.合成酶类:催化有ATP参加的合成反应。A+B+ATPA·B+ADP+Pi1961年酶学委员会(EnzymeCommission,EC)规定酶的表示法:EC.X.X.X.X例如:乳酸脱氢酶1.4酶活性(enzymeactivity)酶活性的表示方法:酶活性指的
5、是酶的催化能力,用反应速度来衡量,即单位时间里产物的增加或底物的减少。V=dP/dt=-dS/dt测定方法:吸光度测定、气体分析、电化学分析等。酶活性的计量:EC1961年规定:在指定的条件下,1分钟内,将1微摩尔的底物转变为产物所需要的酶量为1个酶活国际单位(IU)。比活性(specificityofenzyme)指的是每毫克酶蛋白所具有的酶活性单位数。比活性=活性单位数/酶蛋白重量(mg)比活性反映了酶的纯度与质量。酶促反应的速度曲线随着酶催化的反应进行,反应速度会变慢,这是由于产物的反馈作用、酶的热变性或副反应引起的。但是,在反应起始不
6、久,在酶促反应的速度曲线上通常可以看见一段斜率不变的部分,这就是初速度。在酶的动力学研究中,一般使用初速度的(V0)概念。高效性酶的催化作用可使反应速度比非催化反应提高108-1020倍。比其他催化反应高106-1013倍例如:过氧化氢分解2H2O22H2O+O2Fe3+催化,效率为6×104mol/mol.S过氧化氢酶催化,效率为6×106mol/mol.S专一性即对底物的选择性或特异性。一种酶只催化一种或一类底物转变成相应的产物。1.5酶的特点绝对专一性一种酶只催化一种底物转变为相应的产物。例如,脲酶只催化尿素水解成CO2和NH3。相对专
7、一性一种酶作用于一类化合物或一类化学键。例如,不同的蛋白水解酶对于所水解的肽键两侧的基团有不同的要求。立体专一性指酶对其所催化底物的立体构型有特定的要求。例如,乳酸脱氢酶专一地催化L-乳酸转变为丙酮酸,延胡索酸只作用于反式的延胡索酸(反丁烯二酸)。立体专一性保证了反应的定向进行。R1:Lys,ArgR2:不是ProR3:Tyr,Trp,PheR4:不是Pro酶容易变性这是酶的化学本质(蛋白质)所决定的。酶的可调节性抑制和激活(activationandinhibition)反馈控制(feedback)酶原激活(activationofproe
8、nzyme)变构酶(allostericenzyme)化学修饰(chemicalmodification)多酶复合体(multienzymecomplex)酶在细胞
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