芍药苷在晚期糖基化终产物诱导内皮细胞损伤中的作用及其机制探讨

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1、SOOCHOWUNIVERSITY硕士专业学位论文论文题目芍药苷在晚期糖基化终产物诱导内皮细胞损伤中的作用及其机制探讨研究生姓名陈玉防指导教师姓名谢室专业名称内分泌与代谢病学研究方向糖尿病血管病变论文提交日期2015年5月苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,

2、均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名:降3x1^9日期:滅•IPX.V苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定,即:学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档,允许论文被査阅和借阅,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位论文,可以

3、将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在年—月解密后适用本规定。非涉密论文E/论文作者签名:曰期:v]导师签名:^44,曰期:抓v°j芍药苷在晚期糖基化终产物诱导内皮细胞损伤中的作用及其机制探讨中文摘要芍药苷在晚期糖基化终产物诱导内皮细胞损伤中的作用及其机制探讨中文摘要目的:我们的实验研究证明,芍药苷(PF)在晚期糖基化终产物(AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤中有保护作用,并进一步探讨其潜在的作用机制。方法:1.以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为研究

4、对象,通过晚期糖基化终产物(AGE-BSA)作用建立细胞损伤模型。采用MTT法检测晚期糖基化终产物作用6h后细胞活力的改变,及用25μM芍药苷预处理0.5h后对细胞活力的影响;用蛋白印迹(Westernblot)法测定LC3、P62、RAGE、Atg5蛋白的表达水平的变化。2.利用siRNA进行对Atg5基因及RAGE基因行基因沉默或基因敲减,观察基因敲减后细胞活力及LC3、P62、RAGE、Atg5蛋白表达水平的改变。结果:1.MTT法检测结果显示,与对照组相比,AGE-BSA作用于HUVECs6h后

5、细胞活力明显下降(P<0.001),芍药苷预处理组细胞活力的改变与芍药苷浓度呈剂量依赖关系。同样,westernblot结果显示,与对照组相比,AGE-BSA组LC3-II及RAGE蛋白表达显著增加;P62蛋白稍有表达增加,但无明显统计学意义;与AGE-BSA组相比,25μMPF预处理组LC3-II、RAGE进一步升高(P<0.05),P62表达降低(P<0.05)。2.利用siRNA对Atg5基因及RAGE基因进行基因沉默或敲减后,结果显示,与AGE-BSA和PF+AGE-BSA组相比,siRNA敲减

6、后细胞活力明显下降,LC3-II的表达较前明显减少。结论:芍药苷(PF)通过上调自噬作用,保护晚期糖基化终产物对脐静脉内皮细胞的损伤,并且其能够促进自噬流的完成。晚期糖基化终产物受体(RAGE)在这一自噬保护作用中发挥了重要作用。关键词:脐静脉内皮细胞(HUVECs);晚期糖基化终产物(AGEs);晚期糖基化终产物受体(RAGE);芍药苷(PF);自噬流作者:陈玉防指导老师:谢莹IAbstrcatRoleandmechanismsofautophagyinAGE-BSA-inducedinjuryofh

7、umanumbilicalveinendothelialcellsRoleandmechanismsofautophagyinAGE-BSA-inducedinjuryofhumanumbilicalveinendothelialcellsAbstrcatObjective:TheaimofourstudywastoinvestigatetheprotectiveeffectsofPaeoniflorin(PF)againstinjuryinducedbyAGE-modifiedbovineseruma

8、lbumin(AGE-BSA)inhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs),andtoexaminetheunderlyingmechanismsoftheseeffects.Methods:1.AGE-BSAwasusedtoinduceinjuryinHUVECs.MTTassaywasusedtoexaminethecellviabilityafterAGE-BSAtreatmentfor6

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