蜂花粉多糖的提取及其应用

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1、万方数据!垦墼王些≥:至鲤璺垂笪垫笪曼丝里塑塾鲞垫耍蜂花粉多游的提取及其应用张国锋刁其玉屠焰蜂花粉是养蜂业的一种副产品.它含有一定量的蛋白质、游离氨基酸、多种活性酶、多种维生素、核酸、矿物质、胡萝卜素、生长素、磷脂、糖类等营养成分,是一种无毒副作用的纯天然高级绿色食品,被人们誉为营养素的浓缩体。现代研究证明。蜂花粉能够提高机体T淋巴细胞和巨噬细胞的数量和功能,提高血清免疫蛋白G水平,增强机体免疫功能,从而起到抑制肿瘤和抗癌作用,并且能够有效阻止放化疗损伤,保护机体。蜂花粉的这些生物活性与其含有丰富的多糖有着密切的关系。蜂花粉中的糖类主要是葡萄糖和果糖,还

2、有双糖(麦芽糖和蔗糖)和多糖(淀粉、纤维素和果胶物质1。来源不同的蜂花粉中碳水化合物的含量也有差别。正常情况下,干蜂花粉中所含碳水化合物(平均值)葡萄糖占9.9%、果糖占19%、总糖为3l%、半纤维素为7.2%、纤维素为0.52%.其它成分所占比例不尽相同,不同植物品种对其含量有着直接影响。1蜂花粉多糖的提取蜂花粉多糖的提取f方积年.1984)首先要根据多糖的来源及存在形式决定在提取之前是否作预处理,对于含脂率较高的样品一般采用丙酮、乙醚、乙醇进行预处理以除去脂肪。脱脂后的残渣或不需要脱脂的原料常用水作溶剂来浸取多糖,浸提一段时间后,加乙醇或丙酮沉淀,离

3、心分离沉淀。用乙醇或乙醚脱水。最后真空十燥或冷冻干燥后得粗多糖。此外,按需要也可用碱性水溶液、氯化钠溶液或1%醋酸溶液作溶剂。酸性条件可能致使糖苷键断裂.因此多糖类物质一般采用不同温度的水或稀盐、稀碱溶液进行提取,稀碱液提取法适用于多糖与蛋白质结合在一起的提取。温度控制在60~100℃.时间4。6h。反复提取2~3次。花粉细胞外包围着一层由纤维素、角质和一类为花粉所特有的花粉素等物质构成的壁,它对物理的、张国锋,中国农业科学院饲料研究所,100081。--7其玉(通讯作者)、屠焰,单位及通讯地址同第一作者。收稿日期:2008一ll—03★中央级公益性科研

4、专项“蜂花粉多糖的提取及其在生产安全畜产品中的应用”(00320072241化学的和酶的降解都有相当强的抵抗能力,目前同内外对其所采用的破坏方法通常有机械法、酶法、微生物法、超声波法、微波法、温差法等。1.1传统提取方法·蜂花粉多糖的提取可采用冷水或温水浸提。经有机溶剂沉淀、脱水、干燥后得粗多糖;然后町进行脱蛋白、纯化处理。经破壁的蜂花粉,提取的多糖比未破壁的提高约60%。李道荣(2002)122香蒲花粉多糖为材料,采用正交试验法研究了多糖水提取条件。得出的最佳提取条件为:加水比1:7、提取温度为60℃、提取时间为4h。不同来源多糖对不同提取温度、时间、

5、溶剂量等因素影响呈现不同的提取效果.需要依据情况确定最佳提取工艺。1.2酶法提取除传统的热水浸提外。现在有的采用酶法提取多糖,酶法是利用酶分解细胞壁,使细胞壁部分或完全破坏,即采用复合酶一热水浸提相结合的方法.复合酶多采用一定比例的果胶酶、纤维素酶及中性蛋白酶,此法具有条件温和、杂质易除和提高得率等优点。付宏媛等(2008)利用酶法结合热水浸提甘薯多糖,提取率达到5.55%。通过正交试验得到酶解最适作用条件为:反应时间90min、纤维素酶添加量0.04%、反应温度30℃。张立娟(2005)J1匝过试验得出复合酶的添加量为2%,反应60min;蛋白酶的添加

6、量为1.25%。反应80min时的提取率最高.用此条件提取黑木耳多糖可得到较好的效果。李道荣(2002)发现。经酶解破甓的香蒲花粉。提取的多糖比未破壁的水提法相比,提取率提高66.03%。1.3微生物法由于花粉本身带有大量的杂菌。在处理过程中难免造成污染。并且微牛物还将耗用花粉中的营养物质,生成一些新物质,给进一步的分离纯化增加困难。所以大部分研究多集中于机械破壁和酶法破壁上。1.4超声波法用超声波对植物多糖进行强化提取的报道有很多。超声波破碎过程是一个物理过程,浸提过程中无化学反应,被浸提的生物活性物质在短时间内保持不变,缩短了破碎时间,可极大地提高提

7、取效率。于淑娟万方数据题整鋈塑型鲞垦笪箜;鳖垄塑垒丝丝握垦墨差廛旦等(1995)x,-J真菌多糖的超声波催化酶法提取进行了研究,结果表明,与传统工艺相比.超声波催化酶法操作简单、提取率高,反应过程无物料损失和无副反应发生.是一种可望实用推广的新工艺。杜晓平等(2007)利用超声波破壁技术提取松花粉中多糖物质,确定了其最佳工艺参数为:超声功率400W、同液比1:12、超声时间10min、浸提温度80℃:并采用Sevag法纯化松花粉多糖.经3次除蛋白后松花粉多糖的得率达18.54mg/g,比直接热水提取法提高了2.02倍。’2花粉多糖的纯化2.1去蛋白处理粗

8、多糖中往往混杂蛋白质、色素、无机盐等杂质,必须除去。除蛋广1常用的方法有:(至)

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