山楂蜂花粉多糖提取、分离纯化、结构鉴定和生物活化的研究

《山楂蜂花粉多糖提取、分离纯化、结构鉴定和生物活化的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、北京化工大学硕士学位论文山楂蜂花粉多糖提取、分离纯化、结构鉴定和生物活化的研究姓名：李飞申请学位级别：硕士专业：制药工程指导教师：袁其朋20090602摘要山楂蜂花粉多糖提取、分离纯化、结构鉴定和生物活性的研究近年来，花粉作为优良的全营养食物被全世界广泛关注，掀起一股“花粉研究热"，而且国内对花粉的基础研究和应用研究也己经全面开展，并取得可喜成果，有些方面己进入国际研究的前沿。山楂蜂花粉在中国北方产量巨大，充分利用我国山楂蜂花粉资源，对山楂蜂花粉进行深入系统研究，使这一丰富资源的开发和利用提高到一个新的水平，将会产生极大的经济效益和社会效益。本论文以山楂蜂花粉(beepollenofC

2、rataeguspinnatifidaBge．)为原料，采用复合破壁法即采用机械破壁、冷冻破壁和酶法破壁三种方法进行分花粉破壁，以此达到较为理想的破壁效果。同时通过(Box．Benhnken)试验设计对热水浸提、乙醇沉淀的工艺进行了优化，最后经过脱蛋白、透析得到多糖粗品(CPP)。CPP通过DEAESepharoseCL一6B凝胶柱层析进一步纯化得到CPP．1和CPP一2两种组分。经红外光谱检测证实具有多糖类物质的特征吸收峰。然后通过SephadexG．100凝胶柱层析检测为单一对称峰，并通过高效凝胶色谱测得两者分子量分别为3．7x105Da和7．8x104Da。通过气相色谱测得CPP

3、．1由L一鼠李糖、L-果糖、D一阿拉伯糖、D一木糖、D一甘露糖、D一半乳糖和D一葡萄糖七种单糖组成，其摩尔比为0．67-0．44：10．16：0．66：1．03：5．5l：9．94；CPP．2由L一鼠李糖、D一阿拉伯糖、D一甘露糖、D一半乳糖和D一葡萄糖五种单糖组成，摩尔比为2．12：9．82：3．60：O．89：5．56。经部分酸水解甲基化分析，结合气质联用仪，推断出CPP．1和CPP．2是由1，5．L．Araf残基组成的还原性多糖。最后，本论文从清除DPPH自由基、抑制羟基自由基的产生和还原力、清除超氧阴离子自由基4个方面研究了CPP、CPP．1和CPP．2的体外抗氧化效果，结果表

4、明粗多糖CPP和纯化组分CPP．1、CPP．2对DPPH自由基的清除作用和羟基自由基的抑制作用明显，与Vc接近，而还原力和清除超氧阴离子自由基的能力低于Vc。免疫活性研究主要通过对巨噬细胞吞噬功能的影响、T淋巴细胞增殖功能的影响和NK细胞毒活性的影响来测定，相对CPP．1而言，CPP．2能显著提高小鼠的非特异性免疫和细胞免疫功能。关键词：山楂蜂花粉；破壁；分离纯化；抗氧化活性；免疫活性Ⅱ摘要ISoLATIoN，PUlUFICATIoN，STRUCTUREANDBIoLoGlCALACTIVITIESOFANEWWATER．SoLUBLEBEEPoLLENPoLYSACCHARIDEFR

5、oMCRATAEGUSPINNATIFIDABGE．ABSTRACTInrecentyears，pollenhasbeenusedasaformoffullnutritionfoodallovertheworld．InChina,thefundamentalresearchandapplicativeresearchonpollenhavebeendeeplydevelopedformanyyears，andmanypleasedresultswereacquired，evensomeaspectshaveenteredleadinglevelintheinternationalres

6、earch．BeepollenofafruitCrataeguspinnatifidaBge．，commonlycalledhawthom，whichhashugeaoutputinnorthernChina．Makingfulluseofhawthornbeepollenresourceanddoingsystematicresearchonhawthombeepollenmakeitpossiblethatanewlevelindevelopmentandutilization，andwillbringagreatofeconomicandsocialbenefit．Inthiss

7、tudy,crudepolysaccharideCPPWassuccessfullyisolatedfrombeepollenofCrataeguspinnatifidaBge．bysynthesizingthreeidealwall-breakingeffectsincludingthemechanicway,thetemperaturedifferencewayandtheenzymeway．AtthesametimeBox—Benhnke