多糖的提取_分离纯化及分析鉴定方法研究

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1、第27卷第12期河南科学Vol.27No.122009年12月HENANSCIENCEDec.2009文章编号：1004-3918（2009）12-1524-06多糖的提取、分离纯化及分析鉴定方法研究12111徐翠莲，杜林洳，樊素芳，苏惠，万郑凯（1.河南农业大学理学院，郑州450002；2.河南农业大学烟草学院，郑州450002）摘要：详细介绍了动植物多糖的常见提取、分离纯化方法的最新研究进展，并比较了各种方法的优缺点.每种方法都有各自的优缺点，在提取时应根据所选材料的性质选用不同的方法，有些方法在一定的条件下可与别

2、的方法协同作用，并对糖的含量测定及分析鉴定方法的研究进展作了概述.关键词：多糖；提取；分离纯化；分析鉴定；研究进展中图分类号：O629.12文献标识码：A多糖是由单糖连接而成的多聚物，广泛存在于动物细胞膜和植物、微生物的细胞壁中.对多糖的研究可追溯1936年Shear对多糖抗肿瘤活性的发现，至20世纪50年代，陆续发现一些真菌多糖和高等植物多糖具有明显的抑瘤活性.最近又发现许多中药多糖还具有降血糖作用.70年代以来，科学家们发现多糖及复合物在生物体内不仅作为能量资源和构成材料，重要的是它存在于一切细胞膜结构中，参与细胞

3、的各种活[1-3]动.大量研究表明，许多植物多糖具有生物活性，如免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗辐射、抗菌抗病[4]毒、延缓衰老、保护肝脏等作用，而且对机体几乎无毒副作用，因此引起国内外药理学家、生物学家和化学家[5]们的关注.有些植物多糖还有防治病害的作用，因此多糖研究日益受到关注，国际科学界甚至提出21世纪是多糖的世纪.1多糖的提取方法[6-7]生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3大类.多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位，决定在提取之前是否做预处理.动物多糖和微生物多糖多有脂质包围，一般需

4、要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂，释放多糖.植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、[8]叶、花、果及种子类，在提取前，应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理，目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等.1．1溶剂法1．1．1水提醇沉法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法.多糖是极性大分子化合物，提取时应选择水、醇等极性强的溶剂.用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提渗滤，然后将提取液浓缩后，在浓缩液中加乙醇，使其最终体积分数达到70%左右，利用多糖不

5、溶于乙醇的性质，使多糖从提取液中沉淀出来，室温静置5h，多糖的质量分数和得率均较高.影响多糖提取率的因素有：水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等.为此，研究者对影响多糖提取工艺的这些因素进行了大[9]量研究.李志洲等研究指出，采用V（红枣）∶V（水）＝1∶20，90℃时浸提2h，反复浸提2次，红枣多糖的浸提[10]率可达3．5%.王立娟等以香蕉皮为原料，通过单因子实验结合正交试验研究了香蕉皮多糖的最优提取条件，实验结果表明：香蕉皮粗多糖的最佳提取条件为：以水为提取剂，料液比1∶20，80℃加热提取4次

6、，每次提取时间1．5h.在最佳提取条件下，香蕉皮粗多糖的得率为4．25%.水提醇沉法提取多糖不需特殊设备，生产工艺成本低，安全，适合工业化大生产，是一种可取的提取方法.但由于水的极性大，容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来，从而使提取液存放时腐败变质，为后续的分离带来困难，且该法提取比较耗时，提取率也不高.1．1．2酸提法为了提高多糖的提取率，在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法.如某些含葡萄糖醛酸等收稿日期：2009-07-23基金项目：国家烟草专卖局重大科技攻关项目（110200401004）作者简介：徐翠莲（1

7、965－），女，河南西平人，教授，博士，从事有机化学教学与研究.2009年12月徐翠莲等：多糖的提取、分离纯化及分析鉴定方法研究-1525-酸性基团的多糖在较低pH值下难以溶解，可用乙酸或盐酸使提取液成酸性，再加乙醇使多糖沉淀析出，也可[11]加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出.KimikoAnno将藻粉用甲醇预处理后→取100g预处理－1物→用1．31倍0．17mol·LHCl（pH＝2）在65～70℃提取1h→离心→沉淀再次提取，重复3次→合并上清液，用NaOH中和→真空蒸发至干后溶于0．5L水→离心除去不

8、溶物→加2倍体积乙醇→沉淀用乙醇和乙醚浸[12]洗→真空干燥→得褐藻糖胶粗品17．8g，岩藻糖质量分数为23．7%.任初杰等研究了花生粕多糖的酸提法：花生粕1g→盐酸溶液提取→10000r/min离心15min→取上清液＋3倍95％乙醇沉淀→过夜→10000r/min－1离心15min→沉淀用0．1mol·L盐酸溶液溶解.＋由于H