蓝莓多糖的提取及分离纯化的研究

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1、蓝莓多糖的提取及分离纯化的研究摘要：蓝莓作为人体抗氧化第一卫士的水果，有对衰老、癌症和心脏疾病的抗氧化能力，另外还可以解除眼睛疲劳，改善视力。除此Z外,还能延缓脑神衰老，增强记忆力，还有就是可以预防尿道感染。因此受大家越来越大的重视。蓝莓果实更是加工的上好原料，可制成果酱、蜜饯、糖果、冰淇淋等，蓝霉在食品行业还是有很大研究价值的。而其中作为冇效成分之一的多糖，渐渐进入人们视野。现今，国内外対多糖的研究比较深刻，已经意识到多糖对于医学等生命科学领域中的重要性。因此，关于蓝莓多糖的研究更是成为了热门研究对象。最佳提取工艺为添加纤维素酶反应时间为lOmin,温度40°C添加量为0.6

2、%,多糖所得率2.319%。用Sevage法脱蛋白，最佳脱蛋白率为0.045%所得多糖量最多，为86.538460脱色素的最佳双氧水添加量为30%pH值为9.0氧化时间为3h,温度50°Co在此条件下提取和纯化效果最好。关键词：蓝莓；多糖；提取；纯化［中图分类号1S663.9［文献标识码］A［文章编号］1009-9646(2012)4-0035-04随着人们生活水平的不断改善，人们对健康越来越重视，对疾病的预防也有很大认识。蓝莓作为新兴具有保健功能的浆果已走进人们的视线，其必将掀起一股热潮。我国对蓝毬的加工还处于起步阶段，主要是鲜食和生产速冻产品，深加工产品也不多，主要开发蓝莓

3、汁饮料、蓝莓酒和蓝莓果酱产品。由于蓝莓特冇的活性成分，今后我们开发产品还要考虑其生物功能，研究新产晶。目前国际市场上开发利用的蓝莓生物功能主耍是花色廿的提取物，对于多糖研究不多。而蓝莓色素有其口身缺陷，多糖的兴起成为必然。本文主要在以下方面开展研究工作：（1）将传统水浸液与酶法提取等提取技术应用于蓝莓多糖的提取研究，对比出蓝莓多糖提取的最佳方法，最终确定其最佳工艺参数。（2）对蓝莓的脱色方法进行研究，并确定最佳脱色工艺。（3）对蓝莓多糖脱蛋白方法进行研究，确定脱蛋白T艺。本实验的研究特点和创新：H前国内外对于蓝莓的研究正蓄势待发，对于蓝莓多糖的研究还未见报道。从提取花色昔后的蓝

4、莓残渣屮再提取多糖物质，再利用一些化学制剂分离纯化多糖，这不仅降低了成木，节省能源消耗，还能提高蓝莓产品的商业价值。本课题主要是对蓝莓多糖的提取和分离纯化进行了科学研究。一、材料与方法1.材料与仪器材料：沈阳农业大学食品学院脱色以后的蓝莓，品种是辽宁蓝金实业有限公司的北陆；生化级，国药集团化学试剂有限公司出品的酶活性?1500u/g的纤维索酶，双氧水、葡萄糖、浓硫酸、苯酚、乙醇、丙酮等为分析纯，蒸憎水。仪器：粉碎机，上海世邦有限公司；7200型可见分光光度计，尤尼柯(上海)有限公司；电热恒温水浴锅，常州国华电器有限公司；TDL-5000B型离心机，上海安亭科学仪器厂；RE-52

5、型旋转蒸发仪，上海博通经贸冇限公司；SHZ-TTTB型循环水真空泵，上海华琦科学仪器有限公司；数显pH计，上海精密科学仪器有限公司；DZF-6050型真空干燥箱，上海一恒科技有限公司。1.实验研究内容与方法(1)多糖含量的测定：精密称取105°C干燥至恒重的标准葡萄糖2.559g,定容至500mL容量瓶中；吸取3mL溶液定容于100mL容量瓶中,得到浓度为0.1024mg/mL的标准溶液。分别吸取标准溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8mL于25mL具塞比色管中,加蒸憾水补充至1.OmL；摇匀，分别加入5%的苯酚溶液1.6mL,浓硫酸40°C水浴中

6、放置0.5h,冷却至室温。另取lmL蒸憾水，加同量苯酚和浓硫酸，同法操作，制成空白对照样。溶液在493.5nm处测定吸光度，以吸光度(y)对葡萄糖的浓度(X)进行回归方程的计算。准确称取多糖样液1.0ml,再加5%苯酚1.6ml和浓硫酸7.0ml,其他按照标准曲线做，测吸光度。将所得结果代入回归方程就可得出多糖含量。样品多糖所得率(%)二多糖含量/样詁干重?00%(2)多糖的提取工艺：树莓残渣一粉碎一加水60倍搅拌一调pH值一加纤维素酶一100°C灭酶15niin-水浸lh->3000r/min离心lOmin-醇沉80%-3000r/min离心lOmin-丙酮，乙醇洗涤抽滤一真

7、空干燥得粗多糖传统水浸提法：树莓残渣一粉碎一加水60倍搅拌一调pH值一温度在90-水浸4h-过滤一除蛋白一脱色一真空干燥得粗多糖第一次水提的多糖提取率为2.33%,粗多糖（干重）的提取率为6.82%.第二次酶提的多糖提取率为0.64%,粗多糖（干重）的提取率为1.11%,分别占二次总提取量的21.5%和14%；而在相同条件下无酶提取，提取率仅为0.39%和0.56%。酶法相对无酶水提法提取率分别增加63.3%和98.9%.研究表明，此方法的多糖总提取率达2.97%,粗多糖（干重）的总提取率为