柱前衍生化反相高效液相色谱法检测巯基化合物

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1、柱前衍生化反相高效液相色谱法检测巯基化合物18天津药学TianjinPharmacy2010年第22卷第1期表1样品有关物质测定结果(=2)3讨论3.1色谱条件的选择试验中采用kromasilC.(250mm×4.6mm,5m)色谱柱,用乙腈一0.01mol/L磷酸氢二铵(35:65,10%磷酸调节pH至5.5)系统进行分离,经反复试验,kromasilC可以将主峰与杂质峰进行较好的分离,且主峰保留时间在10min左右.3.2检测波长的选择用流动相溶解盐酸普罗帕酮(浓度20g/m1),进行全波长扫描,在波长210和248.2rim处有峰吸收,在230liB处有谷吸收,在此三波长下

2、进行有关物质检测,以波长248n/l/处检测的杂质峰个数最多,杂质总量最大,因此选择248nm为盐酸普罗帕酮检测波长.3.3色谱柱粗放度的考查分别采用kromasilC.和VecopakC.色谱柱,用乙腈一0.01mol/L磷酸氢二铵系统为流动相进行样品检测,适当调节流动相比例,均可以得到较好的分离,盐酸普罗帕酮理论板数分别为3526和3715,表明上述两种色谱柱均可适用.3.4《中国药典~2005年版中未收载盐酸普罗帕酮的有关物质检测方法,而本方法的建立可以为盐酸普罗帕酮原料及其制剂在存放期间的质量控制,提供可靠的依据.参考文献l邵泓,汪湍.盐酸普罗帕酮片及注射液的HPLC测定

3、.中国医药工业杂志.2001.33(10):463柱前衍生化反相高效液相色谱法检测巯基化合物王进涛,李祥鹏,玄光善(青岛科技大学药学系,青岛266042)摘要目的:建立检测含巯基的化合物柱前衍生化反相高效液相色谱法.方法:以半胱氨酸作为含巯基的模型化合物与N一苯基马来酰亚胺进行衍生化反应,得到半胱氨酸浓度与衍生物色谱峰面积的线性关系,然后将该反应应用到青霉素V钾降解产物的检测.采用HypersilODS2(4.6mm×250mm,5m)色谱柱,乙腈一水(60:40)流动相为,流速0.5ml/min,检测波长223nm.结果:半胱氨酸在5.7143×10..～2×10～moL/L范

4、围内线性关系良好(r=0.9983),平均回收率为99.7l%,RSD为2.94%(n=4),所测青霉素V钾降解产物中巯基化合物的浓度为1.4069×10～m0L/L.结论:所建立的方法灵敏,快速,可用于巯基化合物检测与抗生素降解产物中巯基化合物的代谢与降解的跟踪分析.关键词半胱氨酸,N一苯基马来酰亚胺,柱前衍生化,高效液相色谱,青霉素V钾中图分类号:R927.2文献标识码:A文章编号:1006-5687(2010)01-0018-04Determinationofsulfhydrylcompoundsbypre——columnderivatizationRP——HPLCWang

5、Jintao,LiXiangpeng,XuanGuangshan(DepartmentofPharmacy,QingdaoUniversityofScience&Technology,Qingdao266042)ABSTRACTObjective:Toestablishapre—columnderivatizationHPLCmethodforquantitativedeterminationofsulfhydrylcorn.pounds.Methods:UsingL—CysteineasamodelofsulfhydrylcompoundtoreactwithN—Phe

6、nylmaleimidetoproduceanL—Cys—NPMcomplex.wecouldgetthecalibrationcuneandthenuseittodeterminethedegradationproductsofpenicillinVpot~si—am.TheanalyticalcolumnwasHypersilODS2(5txm,4.6mm×250mm).Themobilephaseconsistedofacetonitrile—water(60:40)andwasmnataflowrateof0.5ml/min.Thedetectionwavelengthw

7、assetat223nm.Results:Thelinearconcentra?tionrangewas5.7143×10一～2×10一m0L/L,withcorrelationcoefficientof0.9983.Theaveragerecoverywas99.71%,andRSDwas2.94%(n=4).Theconcentrationofthethiol—containingcompoundinthedegradationproductsofpenicillinVpot