DNAPKcs表达与鼻咽癌细胞株放射敏感性的关系.doc

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1、DNAPKcs表达与鼻咽癌细胞株放射敏感性的关系作者：曲颂，朱小东，黎丹戎，张玮，曹骥【摘要】目的探讨不同放射敏感性鼻咽癌细胞株CNE1(鼻咽高分化鳞癌细胞株)和CNE2(鼻咽低分化鳞癌细胞株)中DNA依赖蛋白激酶（DNAPK）的催化亚基DNAPKcs基因的表达与鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法通过克隆形成实验测定CNE1、CNE2不同剂量的存活分数，并用线性二次模型拟合剂量存活曲线求出放射生物学参数α、β、SF2、MID值，以及四氮唑蓝比色分析法（MTT法）检测60Coγ线4Gy照射后

2、12h细胞的存活率，以评价两株细胞的放射敏感性。逆转录实时荧光定量PCR技术（RTFQPCR）检测照射前、后不同时间及不同剂量CNE1、CNE2细胞mRNA水平DNAPKcs基因的定量表达。结果CNE1在各个剂量点的存活分数均比CNE2高，MID值分别为2.78、1.61，SF2值分别为0.627、0.341；4Gy照射后12h的存活率分别为88.2%、72.3%；RTFQPCR显示两株细胞中均有DNAPKcs基因的表达，其相对表达量之比为7.54±2.71（t=4.17，P=0.0

3、14），表达差异有统计学意义，DNAPKcs基因在CNE2细胞中存在时间、剂量依赖关系。结论实验验证了CNE2比CNE1对射线更敏感，DNAPKcs基因的表达与鼻咽癌细胞的放射敏感性有关。【关键词】鼻咽癌细胞；实时荧光定量PCR；DNAPKcs；放射敏感性　　Abstract：ObjectiveThisstudywasdesignedtodeterminetherelationshipbetweenexpressionofDNAPKcsgene(acatalyticsubunitofDNA

4、PK,whichisanimportantcomponentinNHEJpathway)andradiosensitivityofnasopharyngealcarcinomacelllines.MethodsRadiosensitivityparametersofnasophryngealcarcinomacelllineswereobtainedbythecolonyformingassayandirradiationdosesurvivalcurveweredonebylinearquadra

5、ticmodel.Thetwocelllineswereexposedto60Coγrayandreceived4Gy,12hourslater,thesurvivalratewereobtainedbyMTTassay,andevaluatedthedifferentradiosensitivityoftwocelllines.Afterreceivingdifferentirradiationdose,thedynamicalchangesoftheexpressionofDNAPKcsinmR

6、NAlevelofCNE1andCNE2weredetectedbyRTFQPCR.ResultsSurvivalrateofCNE1washigherthanthoseofCNE2ateachdosepoint.MeaninactivationdosewashigherinCNE1(2.78)thanthatintheCNE2(1.61),andtheSF2was0.627and0.341respectively.Afterexposedtoirradiationdoseof4Gy，s

7、urvivalrateinCNE1wasalsohigherthanthatintheCNE2.TheratioofrelativeexpressionofDNAPKcsinthetwocelllineswas7.54±2.71（t=4.17，P=0.014）.TheexpressionofDNAPKcsinCNE2wascorrelatedwiththeirradiationdoseandpostirradiationtime.6ConclusionCNE2ismoreradiosensi

8、tivethanCNE1.TheexpressionofDNAPKcsgeneiscorrelatedwiththeradiosensitivityofnasophryngealcarcinoma.　　Keywords：Nasopharyngealcarcinomacellline；RTFQPCR；DNAPKcs；Radiosensitivity　　0引言放射治疗是治疗鼻咽癌的主要手段，但临床上患者对放射敏感性存在个体差异，因此，