鼻咽癌细胞凋亡与凋亡相关基因表达与放射敏感性的关系分析

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1、目录摘要……………………………………………………………………………………1ABSTRACT………………………………………………………………………………2前言……………………………………………………………………………………4材料与方法………………………………………………………………………………71.实验材料…………………………………………………………………………………72.实验方法…………………………………………………………………………………93.质量控制………………………………………………………………………

2、…………174.统计学方法…………………………………………………………………………………17结果…………………………………………………………………………………………19讨论………………………………………………………………………………………………28……小结……………………………………………………………………………………37致谢……………………………………………………………………………………38参考文献……………………………………………………………………………………39综述………………………………………………

3、……………………………………44攻读硕士学位期间发表的学位论文………………………………………………………51导师评阅表………………………………………………………………………………52万方数据新疆医科大学硕士学位论文鼻咽癌细胞凋亡及凋亡相关基因表达与放射敏感性的关系研究研究生：吴冉导师：王若峥教授/主任医师摘要目的：探讨鼻咽癌细胞自发性凋亡及辐射诱发的细胞凋亡对放射敏感性的预测作用，进一步阐明凋亡及放射敏感性存在差异的分子学基础。方法:（1）克隆形成实验测定CNE-1、CNE-2不同剂量照射后的存活分数，单击

4、多靶模型和线性二次函数模型拟合辐射剂量存活曲线并求出放射生物学参数。（2）流式细胞术检测CNE-1、CNE-2自然生长天数（2，4，6，8d）下细胞凋亡情况，RT-PCR、Westernblot方法检测CNE-1、CNE-2自然状态下凋亡相关基因Bax、Bak、Bad、Bid、Bcl-2、Bcl-xl、Bcl-w转录及蛋白表达水平。（3）流式细胞术及RT-PCR方法检测不同剂量X线（2，4，6，8Gy）照射后CNE-1、CNE-2凋亡率及凋亡相关基因Bax、Bak、Bad、Bid、Bcl-2、Bcl-xl、

5、Bcl-w的转录水平。结果:（1）CNE-1在各个剂量点的存活分数均比CNE-2高，函数模型相关参数显示：NCNE-1>NCNE-2，D0CNE-1>D0CNE-2，DqCNE-1>DqCNE-2，αCNE-1<αCNE-2，βCNE-1>βCNE-2，α/βCNE-1<α/βCNE-2，SF2CNE-1>SF2CNE-2。（2）相同培养天数及相同剂量点CNE-2早期凋亡率及晚期凋亡率明显高于CNE-1(均P<0.05)；（3）自然状态下CNE-2中抑凋亡基因Bcl-2、Bcl-xl、Bcl-w及促凋亡基因

6、Bax、Bad、Bid、Bak转录及蛋白表达水平均明显高于CNE-1（均P<0.05）。（4）CNE-1照射后出现Bax表达上调，与辐射剂量呈正相关；Bcl-xl表达下调，与辐射剂量无明显相关性；Bcl-2表达上调，在4Gy时到达峰值后开始下降。CNE-2照射后出现Bax、Bak表达上调，Bcl-w表达下调，与辐射剂量分别呈正、负相关性；Bcl-xl表达下调，与辐射剂量无明显相关性。结论：（1）CNE-2较CNE-1具有更高的辐射敏感性。（2）自发凋亡率及辐射诱发的细胞凋亡率可作为放射敏感性的预测指标。（3

7、）CNE-1、CNE-2放射敏感性差异的机理可能与照射前后多种促凋亡及抑凋亡基因差异性表达有关。关键词:鼻咽癌；放射敏感性；Bax；Bad；Bak；Bid；Bcl-2；Bcl-xl；Bcl-w1万方数据新疆医科大学硕士学位论文RelationshipamongapoptosisandapoptosisassociatedgenesandradiationsensitivityinwellandpoordifferentiatednasopharyngealcarcinomacelllinesPostgrad

8、uate:RanWuSupervisor:Prof.RuozhengWangAbstractObjective:Toinvestigatethespontaneousapoptosisandradiationinducedapoptosisinthepredictionofradiationsen-sitivityofnasopharyngealCarcinomacellandthemoleculebiology