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时间:2018-11-18
《人肺癌细胞株化疗敏感性与基因表达的关系》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、人肺癌细胞株化疗敏感性与基因表达的关系作者:宋现让,魏玲,王兴武,刘贤锡【摘要】目的探讨人肺癌细胞株对化疗药物的敏感性与多药耐药相关基因和凋亡调控基因表达的关系。方法采用MTT法检测5株肺癌细胞SPCA1、NCIH446、SH77、95C和95D对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、5氟尿嘧啶(5Fu)、卡氮芥(BU)的敏感性。流式细胞术检测多药耐药基因P糖蛋白(Pgp)、谷胱甘肽S转移酶π(GSTπ)、肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)等耐药相关基因和Fas、bcl2、p53和p
2、16等凋亡调控基因的表达。结果不同肺癌细胞株对同一药物敏感性有较大差异。相关分析显示,肺癌细胞株对MMC的敏感性与GSTπ和bcl2的表达呈负相关,P值分别为0.040和0.030,GSTπ和bcl2的表达水平较高者,MMC的IC50较高,敏感性较低;对DDP的敏感性与p53蛋白表达水平呈负相关(P=0.036);对其余药物的敏感性与所检基因的表达水平无关(P>0.05)。结论人肺癌细胞株对不同化疗药物敏感与否有不同的机制,对MMC的敏感性与GSTπ和bcl2的表达有关,对DDP的敏感性与p53的表达有关。【关键词】肺癌细胞株流式细胞术化疗敏感性多药
3、耐药相关基因凋亡调控基因TheChemotherapySensitivityandGeneExpressioninLungCancerCellLinesAbstract:ObjectiveToexploretherelationshipofchemotherapysensitivityandexpressionofmultidrugresistancegenesandapoptosisregulationgenesinhumanlungcancercelllines.MethodsMTTmethodycin(ADM),cisplatinum(DDP),mitomyci
4、nC(MMC),fluorouracilum(5Fu),carmustine(BU)infivelungcancercelllinesincludingSPCA1、NCIH446、SH77、95Cand95D.MultidrugresistancegenesincludingPglycoprotEin(Pgp),Glutsthionestransferasesπ(GSTπ),LungresistanceprotEIn(LRP),Multidrugresistancerelatedprotein(MRP),MGMTandapoptosisregulat
5、iongenesFas,bcl2,p53andp16inedbyfloetry(FCM).ResultsThechemotherapysensitivityongthesensitivityonotherdrugsandexpressionofothergenes(P>0.05).ConclusionsThemechanismaboutthesensitivityondivergentdrugsanlungcancercelllines.ThesensitivityonMMChadcorrelationetry;Chemotherapysensitivity;
6、Multidrugresistancegenes;Apoptosisregulationgenes0引言肺癌目前的发病率和死亡率均居我国城市男性肿瘤的首位,约75%的肺癌患者确诊时已属中晚期,化疗是其主要治疗手段,耐药性是影响化疗效果的主要因素。近年来,随着肿瘤分子生物学和对基因功能的深入研究,人们逐渐认识到暴露于化疗制剂后决定肿瘤细胞命运的主要是基因型而非制剂的基因毒性,肿瘤细胞相关基因的表达水平是造成对同一化疗药物敏感性不同的主要原因[1]。为深入探讨肺癌化疗耐药机制,我们以体外培养的5株人肺癌细胞为研究对象,研究其对常用化疗药物的敏感性与耐药相关基因和细胞周期及
7、凋亡调控相关基因表达的相关性,以期为临床用药提供指导。1材料与方法1.1细胞株人肺腺癌细胞株SPCA1、人小细胞肺癌细胞株NCIH446和SH77,低和高转移肺巨细胞癌细胞株95C和95D均购自中科院上海细胞生物学研究所。细胞在含10%FBS(Hyclone)的DMEM(Gibco)培养液(含100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素)中于37℃、5%CO2培养,2~3天传代一次。1.2药物敏感性实验用MTT比色法检测肺癌细胞对阿霉素(ADM)、5氟尿嘧啶(5Fu)、顺铂(DDP)、丝裂霉素C(MMC)和卡氮芥(BU)的敏感性。调细胞密度为
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