人肺癌细胞株化疗敏感性与基因表达的关系论文

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1、人肺癌细胞株化疗敏感性与基因表达的关系论文宋现让，魏玲，王兴武，刘贤锡【摘要】目的探讨人肺癌细胞株对化疗药物的敏感性与多药耐药相关基因和凋亡调控基因表达的关系。方法采用MTT法检测5株肺癌细胞SPCA1、NCIH446、SH77、95C和95D对阿霉素（ADM）、顺铂(DDP)、丝裂霉素（MMC）、5氟尿嘧啶（5Fu）、卡氮芥（BU）的敏感性。流式细胞术检测多药耐药基因P糖蛋白（Pgp）、谷胱甘肽S转移酶π（GSTπ）、肺耐药蛋白（LRP）、多药耐药相关蛋白（MRP）和甲基鸟嘌呤甲基转移

2、酶（MGMT）等耐药相关基因和Fas、bcl2、p53和p16等凋亡调控基因的表达。结果不同肺癌细胞株对同一药物敏感性有较大差异。相关分析显示，肺癌细胞株对MMC的敏感性与GSTπ和bcl2的表达呈负相关，P值分别为0.040和0.030，GSTπ和bcl2的表达水平较高者，MMC的IC50较高.freelotherapySensitivityandGeneExpressioninLungCancerCellLinesAbstract：ObjectiveToexploretherelationsh

3、ipofchemotherapysensitivityandexpressionofmultidrugresistancegenesandapoptosisregulationgenesinhumanlungcancercelllines.MethodsMTTmethodycin(ADM),cisplatinum(DDP),mitomycinC(MMC),fluorouracilum(5Fu),carmustine(BU)infivelungcancercelllinesincludingSPCA1、NC

4、IH446、SH77、95Cand95D.MultidrugresistancegenesincludingPglycoprotein(Pgp),Glutsthionestransferasesπ(GSTπ),Lungresistanceprotein(LRP),Multidrugresistancerelatedprotein(MRP)，MGMTandapoptosisregulationgenesFas,bcl2,p53andp16inedbyfloetry(FCM).ResultsT

5、hechemotherapysensitivityongthesensitivityonotherdrugsandexpressionofothergenes（P0.05）.ConclusionsThemechanismaboutthesensitivityondivergentdrugsanlungcancercelllines.ThesensitivityonMMChadcorrelationetry;Chemotherapysensitivity;Multidrugresistancegenes;Ap

6、optosisregulationgenes0引言肺癌目前的发病率和死亡率均居我国城市男性肿瘤的首位，约75%的肺癌患者确诊时已属中晚期，化疗是其主要治疗手段，耐药性是影响化疗效果的主要因素。近年来，随着肿瘤分子生物学和对基因功能的深入研究，人们逐渐认识到暴露于化疗制剂后决定肿瘤细胞命运的主要是基因型而非制剂的基因毒性，肿瘤细胞相关基因的表达水平是造成对同一化疗药物敏感性不同的主要原因1。为深入探讨肺癌化疗耐药机制，我们以体外培养的5株人肺癌细胞为研究对象，研究其对常用化疗药物的敏感性与耐药相关基因和细胞周

7、期及凋亡调控相关基因表达的相关性，以期为临床用药提供指导。1材料与方法1.1细胞株人肺腺癌细胞株SPCA1、人小细胞肺癌细胞株NCIH446和SH77，低和高转移肺巨细胞癌细胞株95C和95D均购自中科院上海细胞生物学研究所。细胞在含10%FBS(Hyclone)的DMEM(Gibco)培养液（含100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素）中于37℃、5%CO2培养，2～3天传代一次。1.2药物敏感性实验用MTT比色法检测肺癌细胞对阿霉素（ADM）、5氟尿嘧啶(5Fu)、顺铂(DDP)、丝裂霉素C

8、(MMC)和卡氮芥（BU）的敏感性。调细胞密度为1×105/ml，每孔100μl加入96孔板，每种药物设5个浓度倍比稀释等级，每浓度3个复孔。依据文献报道血浆峰值药物浓度（PPC）2和预实验结果确定ADM、5Fu、DDP、MMC和BU的基准实验浓度（BTC）分别为0.4μg/ml、20.0μg/ml、2.0μg/ml、2.0μg/ml和8.0μg/ml，5个倍比稀释浓度分别为1/4、1/2、1、2、4倍BTC。