宫颈癌细胞株放射敏感性研究

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1、学校代码：学号：宫颈癌细胞株放射敏感性研究专业年级：北京协和医学院临床医学专业2005级姓名：导师：明越沈铿(博士生导师、教授)临床学院(北京协和医院)妇产科张福泉(博士生导师、教授)临床学院(北京协和医院)放疗科完成日期：2013年5月10023200501065目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3Abstract．．．⋯．⋯．．．．．．．．．．．．．⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4第一部

2、分前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．1背景介绍⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．61．2不同类型宫颈癌的放射敏感性研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一71．3实验设计思路⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一8第二部分Caski、Siha、Hela三种宫颈癌细胞放射敏感性细胞模型的建立⋯⋯⋯．92．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．92．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102．3实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132

3、．4讨j沧⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．23第三部分三种宫颈癌细胞株不同剂量放射敏感性的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯263．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯263．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯263．3实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯283．4讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．40第四部分三种宫颈癌细胞株不同剂量率生物学特性的研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯474．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯474．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯474．3实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯484．4讨{念⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．51参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．54综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．58致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．65独创性声明及学位论文版权使用授权书⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一66中文摘要背景与目的：宫颈癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤。据全球最新癌症数据统计表明，宫颈癌在女性肿瘤新发病例排名中位居第三位，在女性肿瘤死亡病例中位居第四位。放射治疗是宫颈癌的主要治疗手段之一，近年来发展迅速，涌现出诸多新的放射治疗技术，如调强适形放疗(IMI盯)、容积调强放疗(VMRT)、螺旋断层调强放疗(HT)等。新技术模式与常规放疗相比是否能显著增加宫颈癌的肿瘤控制率并没有明确的结论。本实验旨在探究不同类型宫颈癌细胞株的在不同剂量和不同剂量率射线照射下体外放射敏感性的特点及区别，以期为进一步研究和临床治疗提供理论及实践依据。研究方法：选取三种宫颈癌细胞株：

6、Caski、Siha和Hela细胞株，首先建立3种细胞放射敏感性模型，将三种细胞分别分为对照组与不同剂量组，运用克隆形成实验分析不同剂量下三种细胞的放射敏感性及其差别，利用“多靶单击”数学模型[SF=I．(1．e‘D仍o)N】进行曲线拟合，获得各种细胞的存活曲线及放射敏感性参数2Gy的生存分数、平均致死剂量Do、准阈剂量D。、外推数N，并对3种细胞进行放射敏感性评估。运用MTT实验测定不同剂量不同时间不同细胞的存活比例，绘制不同剂量的细胞生存曲线。应用克隆形成实验分析不同剂量率下三种细胞的放射敏感性及其差别，进行统计分析。研究结果：1、在六孔板中接种细胞密度为2．5X102个细胞，

7、照射剂量选择2Gy、4Gy、6Gy、8Gy、10Gy。2、宫颈癌细胞放射敏感性参数：Caski的SF2为57．37％，Siha为74．77％，Hela为70．62％，三者差异显著(P=0．001<0．05)。MTT实验结果在0-96h内，三种细胞不同剂量间生存曲线无差异(P>0．05)，Caski、Siha、Hela细胞的组间差异集中在120h一168h。3、剂量率效应：Caski、Siha、Hela细胞不同剂量率200cGy／min、400cGy／min、600cG