洛铂对人胃癌细胞株放射敏感性影响的基础研究

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1、东南大学硕士学位论文洛铂对人胃癌细胞株放射敏感性影响的基础研究姓名：郭林申请学位级别：硕士专业：临床医学指导教师：成红艳2012-05-31中文摘要洛铂对人胃癌细胞株放射敏感性影响的基础研究目的观察洛铂(LBP)对人胃癌细胞株BGC823和SGC7901放射敏感性的影响，探讨可能的机制。方法(1)MTT法测定不同浓度LBP对人胃癌细胞株BGC823和SGC790124小时细胞增飧抑制率，计算半数抑制浓度(IC50)，以20％IC50作为增敏浓度；(2)克隆形成实验测定两株细胞单纯照射组(X射线照射剂餐设为：0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)和加药+照射组(LBP

2、增敏浓度+0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy)细胞存活率，绘制细胞存活曲线、计算放射增敏比(SER)和确定干预照射剂量：(3)流式细胞术(FCM)测定两株细胞空白对照组(不照射、不Dll垄j,j)、单纯照射组(二F预剂量X射线)、加药+照射组(增敏浓度LBP+干预剂量X射线)的细胞周期及凋亡率；(4)WesternBlotting测定两株细胞空白对照组、单纯照刺‘组、加药+照射组凋亡相关蛋白Bcl．2、Bax及cleavedcaspase．3表达水平。结果(1)人胃癌细胞株BGC823平11SGC7901增飧抑制牢随LBP浓l'叟-Sli；：jiir'iiSI·高

3、，呈量一效关系，两株细胞IC50分别为16．08ug／m1年1120．66ug／ml，增敏浓度分别选，H3．2ug／ml平1]4．0ug／ml；(2)两株细胞单纯照射组、加药+照射乡[[fltl胞存活率随X射线剂量增加而减小，取4Gy为干预照射剂量，SER分别为1．13和1．08；(3)两株细胞单纯对照组、加药+照射组细胞周期分布与空白对照组相比，加药+照射组与单纯照射组相比，G2／M期比例均升高、S期比例降低，差异有统计学意义(P

4、组、单纯照射组捌I!：率均舟于空白对照组，差异具有统计学意义(P<0．01)，加约+照射f11．约il胞删。I’：牢较l’fI．纯放射组升高(P<0．05)；(4)两株细胞单纯照射组、加约+照射fltl'lq蛋白农j厶水、¨J空E{x,I-j,v,(fl。i的相比，Bcl．2表达水平降低，Bax、cleavedcaspase．3农达水：'FSI‘瑚，篪片j￡订统计学意义(P<0．01)，加药+照射组与j社纯J!{{射flL,HI比，Bcl．2农达水、I‘进。步卜．降，Bax、cleavedcaspase-3表达水平升高，具订统计学謦片(P<0．05)。J!({删‘后，

5、flilJ地抗凋亡蛋白Bcl．2表达水平下降，促凋_『、：蛋I!IBax表达水^V'St‘两，激i，_『iCaspase．3，其I东南人学硕．I：学位论义活化产物cleavedeaspase．3表达水平升高，LBP增强下调Bcl．2和上调Bax的表达水平。结论(1)LBP可抑制人胃癌细胞株BGC823、SGC7901增贿，呈量．效关系；(2)人胃癌细胞株BGC823、SGC7901对X射线敏感，放射线通过调控细胞周期关卡及调节凋亡相关蛋白Bcl．2、Bax表达水平，激活Caspase．3诱导细胞凋亡；(3)LBP对两株细胞有放射增敏作用，可能存在的机制是，将细胞周期阻

6、滞于G2／M期，减少S期分布比例，下调Bcl．2和上调Bax表达水平促进X射线诱导细胞凋亡。关键词洛铂；胃癌细胞株；放射增敏；细胞周期；凋亡英义摘要▲●●●·lADrellmlnarVstucIY0nIV，RadiosensitiVityofLobaplatinonhumangastriccarcinomacelllinesAbstractobjectiveInvestigatetheradiosensitivityeffectofLobaplatin(LBP)onhumangastriccarcinomacelllinesBGC823andSGC7901andthe

7、potentialmechanisms．Methods(1)WeobservedtheinhibitoryratesofdifferentconcentrationsofLBPonhumangastriccarcinomacelllinesBGC823andSGC7901for24hoursbyMTTassay，andcounthalfmaximalinhibitoryconcentrations(IC50s)ofLBPonthetwocelllines．the20％IC50swouldbeusedfortheradiosensitizationco