动物源性食品中志贺氏菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立-论文.pdf

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1、第45卷第8期东北农业大学学报45(8)：98~1022014年8月JournalofNortheastAgriculturalUniversityAug．2014网络出版时间2014—7—1815：01：44【URL]http：／／www．cnki．net／kcms／detail／23．1391．S．20140718．1501．008．html动物源性食品中志贺氏菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立李丹丹，徐义刚，王绥家，高慎阳。，李一经(1．海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心，海El570311：2．黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心，哈尔滨

2、150001：3．辽宁医学院畜牧兽医学院，辽宁锦州121001；4．东jE农业大学动物医学学院，哈尔滨150030)摘要：根据志贺氏茵属高度保守的ipaH基因序列，设计探针和引物，通过优化反应条件，建立检测动物源性食品中志贺氏茵实时荧光定量PCR方法，应用于动物源性食品中志贺氏菌的快速检验。结果表明，该法灵敏度约为2．8cfu·mL-，经对205份肉类、蛋、奶及其制品和动物腹泻物、人工污染样品等进行检测，共检出13份阳性样本，与国标(GB4789．5—2012)方法的检测结果一致。表明建立的荧光PCR方法操作简便、特异性强、灵敏度高。具有良好实用性。关键

3、词：志贺氏茵；ipaH基因；荧光定量PCR；快速检测中图分类号：$855．12文献标志码：A文章编号：1005—9369(2014)08—0098—05李丹丹，徐义刚，王绥家，等．动物源性食品中志贺氏菌实时荧光定量PCR快速检测方法的建立[J】．东北农业大学学报。2014。45(8)：98-102．LiDandan，XuYigang，WangSuijia，eta1．Developmentofadualreal-timePCRfortherapiddetectionofShigellainani-mal-onginedfood[J]．JournalofNo

4、~heastAgriculturalUniversity,2014，45(8)：98—102．(inChinesewithEnglishabstract)DevelopmentofaduaIreal—timePCRfortherapiddetectionofShigellainanimal-originedfoOd／LIDandan’，XUYigang，WANGSuijia’，GAOShenyang。，LIYijingf1．InspectionandQuarantineTechnologyCenterofHainanEntry-ExitInspectio

5、nandQuarantineBureau，Haikou570311，China；2．InspectionandQuarantineTechnologyCenterofHeilongjiangEntry—ExitnInspectionandQuarantineBureau，Harbin150001，China；3．DepartmentofAnimaIHusbandryandVeterinaryMedicine，LiaoningMedicalUniversity,JinzhouLiaoning121001，China；4．SchooIofVeterinary

6、Medicine。NortheastAgriculturalUniversity，Harbin150030，China)Abstract：AccordingShigellaipaHhighlyconservedgenesequences，probesandprimersdesignedbyoptimizingthereactionconditions，theestablishmentoffoodsofanimaloriginShigellareal—timePCRmethod，usedinfoodsofanimaloriginShigarapidtest

7、forShigella．Theresultsshowedthatthesensitivityofadualreal—timePCRwas2．8cfu·mL。。．13fr0m205samplesofmeat，egg，milkanditsproducts，animaldiarrheamaterialsandartificialcontaminationsampleswerepositiveinadualreal—timePCRassay，whichwasinaccordancewiththetestingresultaccordingtoGB4789．5—2

8、012．收稿日期：2014—01—06基金项目：海南省自然科学基金项目(3101