新疆石榴籽中总多酚提取工艺的研究

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1、新疆石榴籽中总多酚提取工艺的研究作者：常占瑛,高晓黎,马桂芝【摘要】　　目的优选出新疆石榴籽中总多酚的提取方法。方法以多酚含量为指标，采用单因素实验设计与正交实验设计优选新疆石榴籽中总多酚提取工艺。结果石榴籽中总多酚最优提取工艺为：乙醇浓度为60%，提取温度100℃，回流提取1次，每次1.0h，每次加乙醇量为石榴籽粉末量的12倍。结论验证实验表明优选出的提取方法稳定，合理，可行。【关键词】新疆石榴籽总多酚提取工艺　　石榴PunicagranatumL.为石榴科Punicaceae石榴属(PunicaL.)落叶灌木或小乔木［

2、1］，全世界共有1属［石榴属（PunicaL.）］，2种，产于地中海及亚洲西部地区，现在主要分布在亚热带及温带地区，在我国南北各地区均有种植。石榴籽具有降低血糖、抗腹泻的功效，并具有显著的抗人体乳腺癌和抗氧化活性，可用于预防和治疗乳腺癌及动脉硬化引起的心脏病，具有延缓人体衰老的功效［2］，这些生理、药理活性都与其所含的多酚类成分有关。　　植物多酚是一类广泛存在于植物体内的多酚类化合物。近年来,多酚类物质的生物活性及对人体的保健预防作用日益受到人们的关注,其清除机体内自由基、抗脂质氧化、延缓机体衰老、预防心血管系统疾病、防癌

3、、抗辐射等生物活性功能的发现,使多酚的研究和应用越来越受到重视［3］。石榴中的多酚类成分主要是黄酮类化合物,浓缩单宁和水解单宁［4］。本文采用单因素实验和正交实验优选了新疆石榴籽中总多酚的提取工艺，为石榴的进一步综合利用提供一定的依据。　　1仪器与材料　　1.1仪器RE-52旋转蒸发器（上海安亭电子仪器厂）；ZK-82B型真空干燥箱（上海市实验仪器总厂）；UV-2550PC紫外-可见分光光度计(日本岛津)；SartoriusBS110S电子天平（北京塞多利）；H左右有最大吸收。　　2.1.1Folin-Ciocalteu试

4、剂的制备在1000ml的磨口圆底烧瓶中加入钨酸钠50g，钼酸钠12.5g,蒸馏水350ml，浓磷酸25ml，浓盐酸50ml，充分混匀，小火回流10h。再加入硫酸锂75g，蒸馏水25ml，溴水数滴，开口继续沸腾15min，使溴水挥发完全为止。冷却后定容至500ml，过滤，滤液呈绿色，置于棕色试剂瓶中保存。使用时加入1倍体积的蒸馏水，此液为应用液，置于冰箱中可以长期保存［5］。　　2.1.2对照品溶液的制备取没食子酸对照品2.79mg，精密称定，置50ml棕色容量瓶中，蒸馏水溶解定容至刻度，作为对照品溶液。　　2.1.3标准曲

5、线的绘制精确吸取上述没食子酸对照品溶液0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5ml于25ml棕色容量瓶中，加适量蒸馏水，依次加入Folin-Ciocalteu试剂1ml和75g/L碳酸钠溶液8ml，蒸馏水定容至刻度，充分混匀后在室温下静置1h，于波长760nm处分别测定吸光度值，以吸光度值（A）对没食子酸含量（C）进行线性回归，得回归方程为A=0.1034C+0.0307，r=0.9999，没食子酸浓度在1.11～7.81μg/ml范围内线性关系良好。　　2.1.4供试品溶液的制备称取20g石榴籽粉末，置于1

6、000ml圆底烧瓶中，照各试验项下条件，回流提取，过滤，真空浓缩，得石榴籽总多酚提取物，蒸馏水定容至100ml，精密吸取1ml置25ml容量瓶中，蒸馏水稀释至刻度，作为供试品溶液。　　2.1.5样品测定方法精密吸取2ml供试品溶液于25ml棕色容量瓶中，依次加入Folin-Cio-calteu试剂1ml，75g/L碳酸钠溶液8ml，蒸馏水定容至刻度，充分混匀后在室温下静置1h，于波长760nm处测定吸光度值，计算其浓度值。　　2.2提取方法的筛选　　2.2.1单因素实验不同乙醇浓度对多酚提取率的影响：将提取次数固定为1次，

7、溶媒量固定为8倍，提取时间固定为1h，提取温度固定为30℃，分别以20%，40%，60%，80%，100%的乙醇溶液为提取溶媒，考察不同浓度的乙醇对石榴籽中总多酚提取率的影响。结果见表1。表1不同乙醇浓度对石榴籽中多酚提取率的影响（略）　　不同提取时间对多酚提取率的影响：将提取次数固定为1次，溶媒量固定为8倍，乙醇浓度固定为60%，提取温度固定为30℃，分别以0.5，1.0，2.0，3.0，4.0h为提取时间，考察不同提取时间对石榴籽中总多酚提取率的影响。结果见表2。表2不同提取时间对石榴籽中多酚提取率的影响（略）不同提取

8、温度对多酚提取率的影响：将提取次数固定为1次，溶媒量固定为8倍，提取时间固定为1h，乙醇浓度固定为60%，分别以30，40，60，80，100℃为提取温度，考察不同提取温度对石榴籽中总多酚提取率的影响。结果见表3。表3不同提取温度对石榴籽中多酚提取率的影响（略）不同溶媒量对多酚提取率的影响：将提取次数固