低氧对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响及其机制探讨-论文.pdf

《低氧对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响及其机制探讨-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、山东医药2014年第54卷第8期低氧对人喉鳞癌Hep一2细胞凋亡的影响及其机制探讨董凯峰，张翠红，宋冬梅，吕欣，张继华，薛海涛。赵玉玲，牛英豪(1河北医科大学第一医院，石家庄050031；2白求恩国际和平医院)摘要：目的观察低氧对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响，并探讨其机制。方法将体外培养的人喉鳞癌细胞分为常氧组、低氧组。流式细胞仪检测细胞凋亡率，RT—PCR及Westernblot法分别检测各组细胞低氧诱导因子仅(HIF一1)、赖氨酰氧化酶(LOX)mRNA及蛋白。结果常氧组细胞凋亡率13．86％±0．12％、低氧组5．13％±0．67％，P<0．

2、05。与常氧组比较，低氧组细胞中HIF一1、LOX蛋白及其mRNA表达增加(P均<0．05)，且二者表达呈正相关(r均为0．862，P均<0．05)。结论低氧可抑制Hep一2细胞凋亡，该作用可能与其上调细胞中HIF一1Ot、LOX表达有关。关键词：喉肿瘤；Hep一2细胞；低氧；凋亡；低氧诱导因子；赖氨酰氧化酶doi：10．3969／j．issn．1002-266X．2014．08．004中图分类号：R73—3文献标志码：A文章编号：1002．266X(2014)08-0012433Efectofhypoxiaonapoptosisofhumanlary

3、ngealcancerHep-2celllineanditsmechanismDONGKai-feng，ZHANGCui-hong，SONGDong—mei，LYUXin，ZHANGji—hua，XUEHai—tao，ZHAOYu—ling，NIUy一hao(1TheFimtHospitalofHebeiMedicalUniversity，Shijianzhuang050031，China)Abstract：0bjectiveToinvestigatetheeffectofhypoxiaonapoptosisofhumanlaryngealcancer

4、Hep一2celllineanditsmechanism．MethodsHumanlaryngealsquamouscarcinomacellsculturedinvitroweredividedintothenormoxic，andhypoxicgroups．Theapoptosiswasdetectedbyflowcytometry，andtheexpressionofhypoxia—induciblefactor(HIF)一1a，lysyloxidase(LOX)proteinandmRNAwasdetectedbyWesternblotandR

5、T—PCR，respectively．ResultsHypoxiasignificantlyincreasedtheexpressionofHIF-·1aproteinandmRNAintheHep-2cellsandtheLOXproteinandmRNAex·-pressionwasup—regulated．Floweytometryshowedthattheapoptosisrateswere(13．86±0．12)％inthenormoxicgroupand(5．13±0．67)％inthehypoxiagroup，statisticallys

6、ignificantdifferencewasf0undbetweenthetwogroups(P<0．05)．ConclusionHypoxiainhibitstheapoptosisofHep-2cells，whosemechanismmaybeassociatedwiththeup—regu—lationofHIF—laandLOXexpression．Keywords：laryngealneoplasms；Hep-2cells；hypoxia；apoptosis；hypoxia·induciblefactor；lysyloxidase肿瘤发生、

7、发展过程中，常处于缺血、低氧微环1材料与方法境状态。研究证实，低氧诱导因子Ot(HIF．1Ot)是调1．1材料Hep．2细胞(河北医科大学第一医院耳控肿瘤细胞适应低氧微环境的核心因子，可诱导多鼻喉头颈外科冻存)，RPMI1640培养基(Gibico公种基因表达，是参与细胞凋亡的重要因子之一⋯。司)；鼠抗人HIF．1、LOX抗体(武汉博士德生物工近来研究表明，赖氨酰氧化酶(LOX)在不同肿瘤组程有限公司)，RNA提取试剂(Invitrigen公司)，cD．织及恶性肿瘤细胞系中的表达既有上调又有下调。NA合成试剂盒及扩增试剂盒(北京Transgene公结果

8、证实，LOX可能具备双重功能，即抑制或促进司)，上、下游引物合成(北京全式金生物公司)，凝肿瘤