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《探讨mg132对人肺腺癌a549细胞凋亡的影响及其机制》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、探讨MG132对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响及其机制[摘要]目的:研究不同浓度蛋白酶体抑制剂MG132对人肺腺癌A549细胞凋亡的作用,并且观察对细胞中Bcl-2和Bad两种凋亡相关蛋白表达的影响。方法:体外培养A549细胞分别暴露于0、5、10、20、40Umol/L的MG132,24h后MTT法测定细胞存活率,流式细胞术(FCW)检测细胞的凋亡率,WesternBlot方法测定A549细胞中Bcl-2和Bad两种蛋白的表达情况。结果:MTT法和流式细胞术检测结果显示,A549细胞的存活率和凋亡率与MG132呈浓度依赖性关系,MG13
2、2浓度越高细胞存活率越低,并且凋亡率越高。WesternBlot方法测定结果显示A549细胞中Bcl-2的表达随着MG132浓度增高而逐渐减少,而Bad的表达无明显变化。结论:MG132可以诱导人肺腺癌A549细胞的凋亡,实现该作用的可能机制部分是通过降低Bcl-2蛋白的表达,而Bad在这一过程中似乎没有表现出明显的作用。[关键词]肺腺癌;蛋白酶体抑制剂;A549细胞;Bcl-2;Bad[中图分类号]R734.2;R730.54[文献标识码]A[文章编号]1673-7210(2011)12(a)-032-03Theeffectandmec
3、hanismontheapoptosisofadenocarcinomaoflungA549celltreatedwithMG132ZHUYi,GONGLi,NIUHongyanDepartmentofChestAurgery,theSecondPeople'sHospitalofHuai'anCityAffiliatedofXuzhouMedicalCollege,JiangsuProvince,Huai'an223002,China[Abstract]Objective:Tostudytheapoptosisofadenocarcin
4、omaoflungA549celltreatedwithdifferentconcentrationsofproteasomesinhibitorMG132,andtoobservetheexpressionofBcl-2andBadinA549cells・Methods:Invitro,A549cellswereexposedto0,5,10,20,40
5、imol/LofMG132.24hourslater,thesurvivalrateofA549cellswasdetectedwithMTTchromatometry,flowcyt
6、ometrydetectedtheapoptosisrateofA549cells,andtheexpressionofBcl-2andBadinA549cellswasmeasuredwithWesternBlot.Results:MG132causedtheapoptosisofA549cellsinaconcentration-dependentmanner,thesurvivalrateofcellswasgraduallydecreasedwhiletheapoptosisrateofcellswasincreasedafter
7、24hoursexposuretoMG132・Meanwhile,theexpressionofBcl-2wasdecreased,andtheBadexpressionwasunchangedinA549cells・Conclusion:MG132couldinduceA549cellsapoptosispartlythroughdepressingtheexpressionofBcl-2,butnotpromotingBadexpression・[Keywords]Adenocarcinomaoflung;Proteasomesinh
8、ibitor;A549cell;Bcl-2;Bad近几十年来,肺癌的发病率和死亡率不断升高。在1998~2002年,肺癌的发病率和死亡率在我国大多数地区居恶性肿瘤的首位⑴;而在2002年肺癌的新病例和死亡人数在全世界也居恶性肿瘤首位[2]。肺癌的病理分型出现腺癌比例增加的趋势。在生物体内蛋白质进行选择性降解的重要途径之一是泛素-蛋白酶体通路(ubiquitinproteasomepathway,简称UPP通路),它在调节细胞凋亡过程中的作用非常重要[3-4],在研究UPP在细胞凋亡中的作用时,蛋白酶体抑制剂(MG132)的应用为我们提供了
9、有力的手段。有研究表明,蛋白酶体抑制剂能够诱导多种人肿瘤细胞的凋亡是通过阻断泛素化通路而实现,但其具体作用机制到目前仍未被阐明[5-6]o该研究应用体外培养的人肺腺癌细胞株A549,并且给予不