自噬对人肺腺癌a549细胞放疗敏感性影响机制的初步探讨

《自噬对人肺腺癌a549细胞放疗敏感性影响机制的初步探讨》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得直昌大堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写)：谂i确确签字日期：de乃年‘月-『日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人

2、授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)多。一专／蛐k月写，口手一已阳年名B签舢师：导期日字磁签I噩豫跏写月手，b名年签p者扎作：、又期沦日位字学签摘要IIlrllIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIY2427682研究背景：放射

3、治疗是肺癌最重要的治疗手段之一，然而却因放疗抵抗极易导致肿瘤的复发和残留。肿瘤的放疗敏感性主要与DNA损伤修复能力有关。研究表明，放疗可诱导肿瘤细胞自噬发生，最新研究也报道，自噬可能与DNA损伤修复过程相关，但通过调控自噬可否影响DNA损伤修复，增加肺癌细胞放疗敏感性尚不清楚。研究目的：本课题旨在研究自噬活化剂雷帕霉素上调A549细胞自噬水平后对放疗敏感性的影响及其分子机制。研究方法：以人腺癌A549细胞作为实验对象，实验设对照组(N)、单纯放疗组(IR)、雷帕霉素联合放疗组(R+RAPA)。①采用MTT法检测雷帕霉素对A549细胞增殖的影响，

4、并计算生长抑制率≤10％的浓度(ICIO)②R组予0．12Gy射线照射，采用克隆形成实验检测细胞增殖活性，并计算Ic50值。③R组及R+RAPA(IClo)予4Gy射线照射，采用Real．timePCR检测Rad51mRNA、Ku70／Ku80mRNA表达，Westernblot检测7-H2AX蛋白、Rad51蛋白、Ku70／80蛋白、p62蛋白、LC3蛋白表达；电镜检测自噬体形成；细胞克隆形成实验检测SF4值。研究结果：①不同浓度雷帕霉素对A549细胞增殖的影响。在10nmol／L．120nmol／L雷帕霉素干预浓度区间，A549细胞抑制率逐

5、渐增高，且呈剂量依赖性p

6、3II增加，LC3II／LC3I比值增加，p62减少；与单纯放疗组相比，放疗联合雷帕霉素组LC3I摘要减少，LC3II增加，LC3II／I比值增加，p62减少⑦<0．05)。表明通过上调A549细胞白噬，可增加放疗敏感性。③雷帕霉素调控白噬影响放疗敏感性的机制。与对照组相比，放疗后1h，放疗组及放疗联合雷帕霉素组"y-H2AX表达增加(／9<0．05)，两组之间无统计学差异；与放疗后lh相比，放疗后24h放疗组及放疗联合雷帕霉素组't-H2AX蛋白表达减少；放疗后24h，与放疗组相比，放疗联合雷帕霉素组Y．H2AX蛋白表达增加(p

7、表明放疗可引起A549细胞DSBs损伤，采用Rapamcin上调A549细胞自噬水平，可使A549细胞DSBs损伤持续存在。与对照组相比，放疗组Rad51蛋白表达增加(p

8、Rad51mRNA于2h、4h增加(p