选择性cox-2抑制剂对人喉鳞癌hep-2细胞裸鼠移植癌血管生成的影响及机制研究

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1、目录选择性COX．2抑制剂对人喉鳞癌Hep．2细胞裸鼠移植瘤血管生成的影响及机制研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8一日lJ吾⋯⋯“⋯一““⋯“”“⋯””⋯””””一⋯“””“““⋯“”“⋯“”。第一部分：尼美舒利对人喉鳞癌Hep．2细胞裸鼠移植瘤血管生成的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOBOO⋯⋯⋯⋯10材料与方法

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14讨论···⋯⋯··⋯··⋯⋯·⋯⋯⋯··⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯······⋯··⋯·15结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17第二部分：尼美舒利抑制人喉鳞癌Hep．2细胞裸鼠移植瘤血管生成的机制研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯OOQOO⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19。1234512■23451l，l，l，l，l1l1l，l{l1上1l1l1．5．3结果⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯271．5．4讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯·⋯⋯·321．6全文总结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯351．7参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯361．8英汉缩略词对照表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯422致谢··一····⋯一·⋯⋯．．⋯⋯””·000“．．⋯”““”⋯“．．”””⋯””·433COX．2与放化疗敏感性的最新研究进展(综述)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45选择性COX-2抑制剂对人喉鳞癌Hep．2细胞裸鼠移植瘤血管生成蝴向及机制研究I嘲鞘摘要目的：原发性喉癌指原发部位在

4、喉部的肿瘤，以鳞状细胞癌(90％)最为常见。喉癌治疗包括手术、放疗和化疗等多种治疗方法。根据病情的分期可选择一种，或多种方法相结合的治疗方式。环氧化酶一2(Cyclooxygenase一2，cox-2)，是催化花生四烯酸合成前列腺素(Prostaglandin，PG)过程中的关键酶，在体内存在COX-1和COX．2两种同工酶。近年来大量研究表明COX-2在多种肿瘤中都存在异常增高表达，在其发病过程中发挥着重要作用。关于COX．2在肿瘤中的作用机制，目前研究表明其可以通过多种途径作用于肿瘤发病过程。前期实验【11已经证实选择性COX．2抑制剂尼美舒利(nimesulide，

5、NIM)可以通过诱导细胞凋亡，抑制细胞增殖的途径抑制人喉鳞癌Hep．2细胞裸鼠移植瘤生长。本实验进一步就NIM对喉鳞癌Hep．2细胞裸鼠移植瘤微血管密度(Microvesseldensity，MVD)、COX．2、血管生成因子一2(Angiopoietin一2，Ang-2)和碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)表达的影响进行观察和研究，以期进一步为NIM用于喉鳞癌的治疗提供理论依据。方法：粱灼萍【l】等在前期试验中，将喉鳞癌Hep．2细胞接种于裸鼠背部皮下，建立移植瘤模型。将裸鼠随机分为实验组和对照组各六只，实验组予裸

6、鼠腹腔注射NIM(50mg／kg／2d，0．2m1)；对照组予裸鼠腹腔注射0．2ml生理盐水。用药4周后，处死裸鼠并获得瘤体。本实验选用粱灼萍实验所获得的喉癌Hep．2细胞裸鼠移植瘤，运用免疫组织化学技术检测CD31在喉癌裸鼠移植瘤组织中表达来定位瘤体中的MVD，运用图像分析系统作平均光密度值测定，并比较两组间的差异；分别采用免疫组织化学染色技术检测喉癌裸鼠移植瘤组织中COX．2、Ang一2和bFGF蛋白的表达情况，运用图像分析系统计算平均光密度值并比较实验组与对照组中COX-2、Ang．2、bFGF蛋白表达情况；采用逆转录一聚合酶链反应(reversetranscrip

7、tion．polymerasechainreaction，RT-PCR)方法检测喉癌移植瘤组织中COX．2，Ang-2和bFGFmRNA的表达，并对两组移植瘤组织中COX．2、Ang．2和bFGFmRNA灰度值进行比较；运用直线相关分别分析实验组中COX．2、Ang．2、bFGF蛋白表达水平与MVD值的相关性。结果：(1)免疫组织化学SP法检测裸鼠移植瘤中CD31表达得到平均MVD值，实验组为12．834-3．06，与对照组25．504-4．85(t=．5．412，P