EGCG拮抗鱼藤酮致PC12细胞凋亡的研究.pdf

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1、第16卷第9期辽宁中医药大学学报V0Ll6No．92014年9月J0URNALOFLIAONINGUNIVERSITYOFTCMSep。，2014D01：10．13194~．issn．1673—842x．2014．09．014EGCG拮抗鱼藤酮致PC12~$胞凋亡的研究郑建波，张兆辉(武汉大学人民医院神经内科，湖北武汉430060)摘要：目的：探讨表没食子儿茶素(epigauocatechin一3一gallate，EGCG)对PCI2细胞的保护作用及机制。方法：采用鱼藤酮(1mol／L)处理PC12细胞24h，建立帕金森病细胞模型；EGCG(5mol／L)预处理P

2、C12细胞3Omin。采用CCK一8测定细胞活力；AnnexinV—FITC／PI流式细胞仪检测细胞凋亡率；检测Caspase一3酶活性和线粒体膜电位，并检测Bcl一2表达。结果：1mol／L鱼藤酮处理后，细胞活力为(38．5±4．3)％，细胞凋亡率为37．7％，DHE和DHR123荧光强度均明显增加，分别为正常组的231％和335％，线粒体膜电位为正常组的45％，caspase一3活性为正常组的145％，Bcl一2表达显著下调。而5mol／LEGCG预处理后，细胞活力为(69．6±5．6)％，细胞凋亡率降至21．4％，DHE和DHR123荧光强度分别为正常组的1

3、78％和287％，线粒体膜电位为正常组的57％，caspase一3活性为正常组的120％，Bcl一2表达上调，与鱼藤酮组比较，差异均有统计学意义(P<005)。结论：EGCG对PC12细胞具有保护作用，保护机制与其抗氧化活性及抗凋亡有关。关键词：帕金森病；表没食子儿茶素；鱼藤酮；氧化应激；凋亡中图分类号：R742．5文献标志码：A文章编号：1673—842X(2014)09—0041—04PreventiveEffectofEGCGagainstRotenone-inducedApoptosisinPC12CellsZHENGJianbo．ZHANGZhaohui

4、(DepartmentofNeurology，RenminHospitalofWuhanUniversity，WuhanAbstract：0bjective：Toinvestigatethepotentialprotectiveefectofepigall0catechin一3一gallate(EGCG)onr0ten0ne—inducedapoptosisofPCi2ceilsandthepossiblemechanisms．Meods：PC12cellsweretreatedwith1LLmol／Lrotenonefor24htoestablishamodel

5、ofParkinson’sdisease(PD)．Basedonthismodel，PC12cellswerepretreatedwithEGCG(5mol／L)for30minbeforerotenonetreated．ThecellsurvivalwasdeterminedbytheCCK-8method．Apoptosiswasdetectedby丑owcytometry．Intracellularreactiveoxygenspecies(ROS)wasassessedbvFCMusingthefluorescentdyes，dihydroethidium

6、(DHE)anddihydrorhodamine123(DHR123)．Caspase-3activityandmitochondrialmembranepotentialwerealsomeasured．TheexpressionofBcl-2wasdetectedbyWesternblot．Resuhs：FtomthedataofCCK-8，thecellproliferationofPC12cellswasinhibitedbyrotenone。andthecellsurvivalratewas(38．5±4．3)％．Aftertreatedwithrote

7、nonefor24h．theapoptosisrateofPC12cellswas37．7％．ThefluorescenceintensityofDHEandDHR123wasincreasedto231％and335％ofcontrols，respectivelv．Mitochondrialmembranepotentialwasdecreasedto45％ofcontrols．andtheactivityofcaspase一3increasedto145％ofcontrols．TheWesternblotshowedthatrotenonedown—regul

8、atedB