SiRNA干扰结肠癌转移相关基因1表达对卵巢癌顺铂化疗耐药性的影响-论文.pdf

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1、肿瘤2014年1月第34卷第1期TUMORVo1．34，January2014WWW．tumorsci．org7DOI：10．3781~．issn．1000—7431．2014．01．002Copyright~2014byTUMOR基础研究·BasicResearchSiRNA干扰结肠癌转移相关基因1表达对卵巢癌顺铂化疗耐药性的影响李霞，史惠蓉，邓佑兴，张瑞涛郑州大学第一附属医院妇产科，河南郑州450052【摘要】目的：利用RNA干扰技术抑制结肠癌转移相关基因1(metastasis—associatedincoloncancer1，MACC1

2、)在顺铂(cisplatin，DDP)耐药的卵巢癌细胞株SKOV-3／DDP中的表达，并探讨其对DDP化疗耐药性的影响。方法：RNA干扰分为3组，空白对照组为未经处理的SKov-3／DDP细胞，阴性对照组为空质粒转染的SKov．3／DDP—shVector细胞，实验组为MACC1一shRNA重组质粒转染的SKov_3／DDP—shMACC1细胞。反转录PCR法和蛋白质印迹法检测稳定转染后SKov_3／DDP细胞中MACC1mRNA和蛋白的表达情况，MTT法检测细胞对DDP的耐药性变化，FCM法检测细胞凋亡变化。结果：相比于未转染组SKOv_3／

3、DDP细胞，MACC1一shRNA转染组SKOV-3／DDP—shMACC1细胞中MACC1的mRNA及蛋白水平均明显下调『下调百分率分别为(83．39±1．26)％和(82．25±2．94)％，P<0．05]。DDP对SKov_3／DDP—shMACC1细胞的半数抑制浓度(halfinhibitoryconcentration，IC。)值与未转染组和空质粒转染组细胞的IC。值比较，均明显降低[(26．09±0．91)gmol／Lvs(47．5O±0．40)gmol／L和(47．O8±0．45)gmol／L，P<0．051。SKOV-3／DDP

4、—shMACC1细胞凋亡率明显提高[(13．77±0．60)％vs(3．63±0．30)％和(4．23±0．30)％，P<0．05]。结论：RNA干扰抑制MACC1基因表达能增强卵巢癌耐药细胞SKo3／DDP对DDP的敏感性。【关键词]卵巢肿瘤；RNA干扰；抗药性，肿瘤；顺铂；结肠癌转移相关基因1【中图分类号】R737．31【文献标志码】A【文章编号】1000—7431(2014)01—0007—06EffectofsiRNAtargetingMACClgeneonchemoresistancetocisplatininovariancance

5、rLlXia。SHIHui—rOng，DENGYou—xing，ZHANGRui—taoDepartmentofGynecologyandObstetrics，FirstAffiIiatedHospitalofZhengzhouUniversity，Zhengzhou45O052，HenanProvince，China【ABSTR0～CT]0bjective：Toknockdowntheexpressionofmetastasis—associatedincoloncancer～1(MACC1)geneindrug—resistantovari

6、ancancercelIIineSKOV3／cisplatin(DDP)byRNAinterferencetechnology．andtoinvestigateitseffectonchemoresistancetoDDP．Methods：0variancancerSKOV3／DDPcellswerenottransfected(blankgrouP，namedasSKOV3／DDPcells)，ortransfectedwithemptyplasmid(negativecontrolgrouP，namedasSKOV一3／DDP—shVect

7、orceIls)orcombinantPlasmidcontainingMACC1specificsmaIlhairpinRNA(shRNA)(experimentaIgrouP，namedasSKOV一3／DDP—shMACC1cells)．ThemRNAandProteinexPressionsofMACC1weredetectedbyreversetranscription—PCR(RT—PCR)andWesternblotting，respectively．Thehalfinhibitionconcentration(IC50)ofDD

8、PwasdeterminedbyMTTassay．Theapoptosiswasexaminedbyflowcyometry．Results：Afte