sirna沉默结肠癌转移相关基因1表达对人类卵巢癌细胞株侵袭转移的影响

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1、·24·肿瘤研究与临床2014年1月第26卷第1期CancerResearchandClini!，盟!．!：!——·论著·siRNA沉默结肠癌转移相关基因1表达对人类卵巢癌细胞株侵袭转移的影响李祯生秀杰孙曼汪志辉刘启才【摘要】目的检测结肠癌转移相关基因1(MACC1)在卵巢癌细胞株中的表达，并探讨用siRNA技术抑制其表达对卵巢癌细胞生物学行为的影响。方法应用实时荧光定量PCR(RT—qPCR)及Westernbl0t法检测OVCAR3、ES一2、SKOV3、HO一8910卵巢癌细胞株中MACC1的表达，合成MACC1特异性siRNA并转染OVCAR3细胞，利用RT—qP

2、CR筛选并鉴定MACC1基因有效沉默后，应用体外黏附实验、Transweu迁移及侵袭实验、体外血管拟态实验检测MACC1基因沉默后OVCAR3细胞的体外黏附、迁移、侵袭及血管生成能力的变化。结果OVCAR3细胞较其他卵巢癌细胞株高表达MACC1。MACC1基因沉默后，OVCAR3细胞的体外黏附能力受到不同程度的抑制；Transwell迁移实验中，MACC1siRNA干扰的OVCAR3细胞(干扰组)转入底层膜的细胞数为f245．5±12．8)个，低于阴性对照组和空白对照组【分别为(500．3±16．5)、(496．3±13．1)个，均P<0．05]；Transwell侵袭实

3、验中，干扰组转入底层膜的细胞数为(185．3±14．1)个，低于阴性对照组和空白对照组『分别为(405．7±9．1)、(416．3±115)个，均P<0．051；体外血管拟态显示干扰组细胞多呈散在分布，连接减少，形成的完整结构少。结论利用siRNA技术抑制MACC1基因表达可有效抑制卵巢癌OVCAR3细胞的体外转移和侵袭能力，MACC1有望成为卵巢癌治疗的靶基因。【关键词】卵巢肿瘤；肿瘤转移；RNA干扰；结肠癌转移相关基因1Efectsofreducedgeneexpressionoftedincoloncancer1byRNAinterferenceontheinvas

4、ionandmetastasisofovariancancercellsLiZhen*，ShengXiujie，SunMan，WangZhihui，LiuQicai．*DepartmentofGynecology,theThirdAfiliatedHospitalofGuangzhouMedicalUniversity,KeyLaboratoryforMajorObstetricsDiseasesofGuangdongProvince，Guangzhou510150，ChinaCorrespondingauthor：ShengXi~ie，Email：xjsheng@gze

5、mail．cn【Abstract】ObjectiveToexaminetheexpressionofmetastasis—associatedincoloncancer1(MACC1)geneinovariancancercelllinesandinvestigateitseffectonbiologicalbehaviorsofovariancancercells．MethodsTheexpressionofMACC1wasexaminedbyqRT—PCRandWesternblotanalysisinfourovariancancercelllinesinculdi

6、ngOVCAR3，ES一2，SKOV3andHO一8910．WhentheMACC1wastransfectedtoOVCAR3cells，fluorogenicquantitativePCRwasusedtofilterandidentifyMACC1geneaftertheeficientsilencing．Changesofadhesioninthecellswereanalyzedbyanadhesionassay．Transwellmigrationandinvasionassayandinvitrovascularmimicryassaywereusedtod

7、etectmigration，invasionandangiogenesisofOVCAR3cellsinvitro．ResultsTheexpressionofMACC1genewashigherinOVCAR3comparedtoothercelllines．qRT—PCRconfirmedthattheexpressionofMACC1wassilencedsuccessfullyaftertransienttransfectedMACC1一siRNAintoOVCAR3cells．Aftersuccessfulsile