sirna沉默upar和cathepsin b基因表达对肝癌细胞增殖、侵袭、凋亡的影响

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1、户曲虔种乂嗦．纖子学号２０，２２０２２２ＧｕａｎｘｉＭｅｄｃａｎｖｅｒｓｔｇｉｌＵｉｉｙ＾硕±学位论文ｍｓｉＲＮＡ沉默ｕＰＡＲ和Ｇａｔｈ巧ｓｉｎＢ基因表达对巧癌细胞增殖、侵袭、调ｔ的影响石注注々／貝／目导师姓名：吕小平专业名称；消化内科申请学位类型；科学学位答辩委员会主席：梁列新答辩委员会委员；梁列新陈远能唐国都黄雪赖铭裕二〇－五年五月原创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得巧研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｌ乂标注和致

2、谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含获得广西医科大学或其他教育化构的学位或证书使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均臣在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签雀：乂签字曰期：年巧ｉ曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：在校期罔论文的知识产权属广西医科大学。学校有权保存论文的电子和纸质文档，可借阀或上网公布本论文的部分或全部巧容、、汇编学位论文。，可Ｌ乂采用影印复印或其它手段保存学校可Ｌ乂向

3、国家有关机关或机构送交论文的电子和纸质文档，允许论文被查阅和借阅。同意广西医科大学可Ｌ义用不同方式在不罔媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。保密论文在解密后遵守此规定。学位论文作者签名：：＾导师签字签字曰期／曰：＞ｓ年ｒ月如签字日期：择＾月＾个人简历基本情况：石清清性别姓名：女民族汉族出生年月－－：１９８６０６０６籍贯；广西省桂平市政治面貌：党员学习工作经历起止时间所在院校或单位学历学位职称２００６？．９２０１０．３广西医科大学本科学生一？２０１０

4、．３２０１１．５南宁市第人民医院本科实习医师？２０１１．７２０１２．７容县人民医院本科见习医师？２０１２．９２０１５．６广西医科大学硕±学生研究生期间科研经历项目起止时间项目名称项目来源本人承担任务？２０１３．３２０１４．７ＲＮＡｉ沉默ｕＰＡＲ和广西科学研究实验操作、数据ＣａｔｈｅｓｉｎＢ基因对肝与技术开发计统计及分析、论ｐ癌的视向治疗及其机划课题文撰写及发布制研究目录一、中文摘要１二、英文摘要４Ｈ、前言８四、论文正文第一部分材料与方法

5、１１实验结果２８第二部分材料与方法３２实验结果：３８讯仑４５小结５０五、参考文献５１屯、附录（英文缩略词与中文对照）５４六、综述５６八、致谢６８九、研究生期间所发表的论文６９ｓ、１ｉＲＮＡ沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因表达对肝癌细胞増殖、侵袭调亡的影咱２０２级硕±研巧生学位论文ｓｉＲＮＡ沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因表达对肝癌细胞增殖、侵袭、调亡的影响摘要目的；探讨ＳｉＲＮＡ单独或联合沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因对肝癌

6、细胞增殖、侵袭、调亡的影响。方法－）；用带癸光的ｓｉＲＮＡ转染人类肝癌细胞（ＳＭＭＣ７７２１，筛选合适的ＳｉＲＮＡ转染浓度，该浓度进行实验。分别人工构建并合成鞭向一沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因的Ｈ条ｓｉＲＮＡ和条阴性ｓｉＲＮＡ。转染人类肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１后，实时巧光定量ＰＣＲ技术和ＷＢ技术分别检测基因水平上和蛋白水平上沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因最好的ｓｉＲＮＡ，筛选出的两个ＳｉＲＮＡ用于后续实验。单独或联合转染后，炎光定量ＰＣＲ技术和ＷＢ技术分别检测ｕＰＡＲ和Ｃａｔｈ

7、ｅｐｓｉｎＢ的基因表达水平和蛋白表达水平。ＭＴＴ实验检测单独或联合沉默ｕＰＡＲ和Ｃａ也ｅｐｓｉｎＢ基因后癌细胞的增殖情况。基质胶侵袭实验检测细胞侵袭能力的改变。流式细胞技术检测肝癌细胞调亡率的变化。结果：１．按Ｒｏｃｈ说明书，从不同比例的转染试剂和ＳｉＲＮＡ中筛选出转染最佳浓度，我们发现低浓度ＳｉＲＮＡ进行转染，转染率达８０％，细胞状态最好。２．按低浓度ＳｉＲＮＡ进行转染，实时焚光定量ＰＣＲ法分别检测各组巧癌－细胞ＳＭＭＣ７７２１的ｕＰＡＲ和Ｃａ也ｅｓｉｎＢ基因水平。结果显示，转染４８ｈｐ１

8、ｓ、ｉＲＮＡ沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因表达对肝癌细胞増殖侵袭、调亡的影巧２０１２级硕±研究生学位论文－Ｈ个ｓｏｉＲＮＡ组的后，与空白对照组（ｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｏｎｔｒｏｌ，ＮＴＣ）相比，ｕＰＡＲ和Ｃａ