sirna介导bmpr-ⅱ基因沉默对人肝癌hepg2细胞增殖和侵袭的影响

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1、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得直昌太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写)：荏弄签字日期：口2。f多年<月L日，爿＼I学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本

2、人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所和中国学术期刊(光盘版)电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发一表，并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名(手写)：荔开导师签名(手写∑拗签字日期：JDf)年舌月1,／日签字日期：2·乃年<月1日摘要IYIIIIqlll2lllql4lllllll2lllll7llllqllllblll

3、4llllll2lllllY2427142背景与目的：原发性肝细胞癌是我国常见的恶性肿瘤之一，近期研究发现骨形态发生蛋白(bonemorphogeneticproteins，BMPs)信号通路在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。本研究采用RNA干扰技术(RNAinterference，RNAi)抑制骨形态发生蛋白受体II(bonemorphogeneticproteinreceptor，BMPR-II)表达，观察抑制效果及抑制BMPR．II表达后对人肝癌HepG2细胞增殖和侵袭的影响。方法：设计并化学合成针对BMPR-Ⅱ的3对小干扰RNA(smalli

4、nterferingRNA，siRNA)，阳离子脂质体法瞬间转染HepG2细胞。采用离体培养肝癌HepG2细胞，并设正常对照组、空白对照组、阴性siRNA组及siRNA．BMPR-II．a、siRNA．BMPR．II．b、siRNA．BMPR．II．C转染组。各组培养48h后，运用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot法检测HepG2细胞中BMPR-II在mRNA和蛋白水平表达的变化，MTT比色法及Transwell侵袭实验检测转染后细胞增殖及侵袭能力的变化。结果：RT-PCR、Westernblot显示3对特异性siRN

5、A．BMPR．II转染组转染48h后，其BMPR-II的mRNA和蛋白表达与另三组比较受到明显抑制，以siRNA．BMPR．II．a抑制效果最明显(0．70士0．06、0．45士0．10，P<0．05)。MTT比色法及Transwell侵袭实验显示，转染48h后，siRNA．BMPR．II．a转染组HepG2细胞的生长及穿膜数(48．27％-40．76％、25．20士1．60，<0．05)明显低于正常对照组(82．64％-40．67％、60．40士1．39)及阴性对照组(81．21％-40．80％、59．50士1．85)。结论：siRNA干扰介导B

6、MPR-II基因沉默可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖和侵袭能力，BMPR．II可作为肝癌抗肿瘤治疗的新靶点。关键词：肝癌；RNA干扰；骨形态发生蛋白受体II；增殖；侵袭。AbstractBackgroundandpurpose：ABSTRACTPrimaryhepatocellularcarcinomaisoneofthemostcommonmalignanttumorsinourcountry．Recentstudiesshowedthatbonemorphogeneticproteins(BMPs)signalingpathwaysplayak

7、eyroleinthedevelopmentoftumors．ThisstudyaimedtoinvestigatetheeffectofsmallinterferingRNA(siRNA)ontheinhibitingofbonemorphogeneticproteinreceptor(BMPR—II)，andtoobserveitseffectontheproliferationandinvasionofhumanhepatomaHepG2cellsafterBMPR．IIsilencing．Methods：Threepairsofspecif

8、icsiRNAtargetingBMPR-11weredesignedandsynthesized，andthentran