吴茱萸碱对人肝癌hepg2细胞增殖、侵袭和迁徙的影响研究

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1、中图分类号：R735.7单位代码：i〇66CUDC：616-006学号：10660S120171.学科专业代码：100208密级：公开贵阳医学院2015届硕士学位论文(科学学位）吴茱萸碱对人肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和迁徙的影响研究ResearchofEvodiamineonproliferation,invasionaadmetastasisoftiumanhepatocellularcarcinomaHepG2cell研究生：孙建超导筛:蒋红梅教授王豫萍教授年级：2012级专业：临床检验诊断学〇一五年五月贵阳医学院学位论文原创性声明本人

2、郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除了文中特别加以标注引用的内容外/本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。除与外单位合作项目将予以明确方式规定外，本研究已发表与未发表成果的知识产权均归属贵阳医学院。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。—年」c月」4日輒-—年月本日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借

3、阅。本人授权贵阳医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于（请在以下相应方框内打“V”）：1、保密□，在_年解密后适用本授权书。2、不保密b/作者签名（手写）：A'、电赛导师签名（手写）：年本月■^日7^年f月V

4、曰图分类号：R735.7单位代码：10660UDC：616-006学号：10660S120171学科专业代码：100208密级：公开贵阳医学院2015届硕士学位论文（科学学位）吴茱萸碱对人肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和迁徙的影响研究Resear

5、chofEvodiamineonproliferation,invasionandmetastasisofhumanhepatocellularcarcinomaHepG2cell论文作者：孙建超指导教师：蒋红梅教授王豫萍教授申请学位：医学硕士培养单位：贵阳医学院研究生院学科专业：临床检验诊断学研究方向：肝病临床免疫研究起止日期：2013年5月至2015年1月论文评阅人：盲评答辩委员会主席：田维毅教授论文答辩日期：2015年5月19日二〇一五年五月吴茱萸碱对人肝癌HepG2细胞增殖、侵袭和迁徙的影响研究专业：临床检验诊断学硕士研究生：孙建超导

6、师：蒋红梅教授王豫萍教授【摘要】目的：探讨吴茱萸碱对人肝癌细胞株（HepG2细胞）增殖、侵袭及迁徙能力的影响及进一步探究吴茱萸碱对人肝癌HepG2细胞的可能作用机制。方法：以人肝癌HepG2细胞为受试细胞，实验设置正常对照组、吴茱萸碱5.0、12.5、25.0、50.0、100.0µmol/L处理组，噻唑蓝法（MTT）检测肝癌HepG2细胞增殖抑制率，Transwell小室检测吴茱萸碱对HepG2细胞侵袭以及迁徙能力的影响，划痕实验检测吴茱萸碱对HepG2细胞伤痕愈合率的影响，集落形成实验检测吴茱萸碱对HepG2细胞集落形成能力的影响，蛋白印

7、迹法（Westernblot）检测吴茱萸碱对HepG2细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白、细胞外信号调节激酶（ERK1/2）、磷酸化细胞外信号调节激酶(Phospho-ERK1/2、p-ERK1/2)蛋白表达的影响。结果：不同药物浓度的吴茱萸碱对HepG2细胞增殖抑制能力明显高于对照组，呈现时间-剂量依赖关系（P<0.05），即随药物浓度增加及作用时间延长抑制效果更明显；吴茱萸碱5.0、25.0、50.0µmol/L作用后，HepG2细胞侵袭细胞数分别为32.3±1.3个、22.3±2.5个、10.6±3.7

8、个，对照组为97.6±6.3个，差异有统计学意义(P<0.05)；HepG2细胞迁徙细胞数为57.7±3.2个、26.8±1.6个、15.4±3.9个，对照组为106.3±3.2个，差异有统计学意义(P<0.05)；与对照组比较，吴茱萸碱5.0、25.0、50.0µmol/L处理组HepG2细胞24、48小时伤痕愈合率分别为（23.31±1.03）%、（10.37±1.06）%、（7.92±1.40）%和（13.86±5.57）%、（1.78±3.08）%、(0±0)%，差异有统计学意义（P<0.05）；5.0、25.0、50.0µmol/L

9、吴茱萸碱作用HepG2细胞集落形成数分别为147±12.1、94.3±4、0，对照组为231.3±15.4，差异有统计学意义(P<0.05；吴茱萸碱5.0、25.0