beclinl基因sirna沉默对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

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1、Beclinl基因siRNA沉默对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响计：学位论文：36页表格：2个插图：10幅李晓姝指导教师：郭晓钟教授申请学位级别：硕士学位论文提交日期：2012年4月学位授予单位：大连医科大学专业名称：内科学论文答辩日期：2012年5月学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：独创性声明IIIIIIIIJIIIIIIIIUlHIIIIIIIIIIIIIIIIIIUIY2282961本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外

2、，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：趄签字日期：垒!兰年上月止日关于学位论文使用授权的说明《Beclinl基因siRNA沉默对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响》系本人在大连医科大学攻读(博士、硕士)学位期间在导师指导下完成的学位论文。本人及指导教师完全了解大连医科大学关于保存、使用学位论文的规定，同意学校保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子

3、版本，允许论文被查阅和借阅，同意学校将本论文加入：1．中国学术期刊(光盘版)电子杂志社——《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文数据库》及CNKI相关数据库。2．中国科学技术信息研究所——《中国学位论文全文数据库》3．国家图书馆本人授权大连医科大学，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文，可以公布论文的全部或部分内容。论文作者签名：越指导教师签名：签字曰期：目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯··1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(

4、二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(二)第一部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8(三)第二部分⋯⋯⋯000⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14(四)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23(五)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·：⋯

5、⋯⋯⋯⋯‘26(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32四、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36BeclnI基因SiRNA沉默对胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响硕士生姓名：专旨导教师：指导小组：专业名称：李晓姝郭晓钟教授王立生教授王华博士李宏宇博士任丽楠博士内科学摘要背景与目的：自噬(autophagy)是细胞利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程，是真核细胞特有的生命现象，对于细胞清除废物、重建结构以及生长发育、

6、维持内环境稳定起到重要的作用，并且与多种疾病的发生密切相关。Beclinl基因与酵母自噬基因At96同源，是调控自噬的重要基因。它主要通过P13K途径与其他自噬相关蛋白形成复合体，并介导其他自噬蛋白定位于前自噬小体，参与调控哺乳动物自噬体的形成。最新的研究表明，Beclinl基因不仅是参与自噬体形成过程的关键因子，而且与肿瘤等多种疾病的发生有密切关联。Beclinl基因在人类组织中分布广泛，在不同的组织细胞中均能够检测到其表达。目前发现有多种肿瘤细胞存在Beclinl等自噬基因的缺陷，因此导致肿瘤细胞能够逃避自噬性死亡

7、。而稳定转染Beclinl后促进了细胞的自噬活性，同时降低了其成瘤能力。另外，某些抗肿瘤药物也有可能通过自噬机制在肿瘤治疗方面发挥作用。总之，Beclinl与肿瘤发生之间存在着复杂的联系，但其具体机制仍不十分明确。胰腺癌是消化系统常见的恶性肿瘤，因其进展快，死亡率高等特点也被认为是预后最差的恶性肿瘤之一。手术及放、化疗等治疗方式疗效均不理想。随着分子生物学的进展，目前通过自噬途径干预正在成为肿瘤治疗研究中新的切入点，有关肿瘤细胞的生物学效应和分子机制的研究将为治疗胰腺癌提供新的希望，具有光明的前景和重要的临床意义。基于

8、上述，本研究将以人胰腺癌细胞系Miapaca2作为研究对象，通过基因转移技术将构建的Beclinl的干扰序列siRNA转导入人胰腺癌细胞系Miapaca2中，采用CCK一8、免疫印记、RT—PCR以及流式细胞仪分析等多种方法，在体外细胞培养实验中观察Beclinl．siRNA对Miapaca2细胞的增殖、细胞周期和凋亡的影响，以及