沉默GST-π基因表达对EC9706／cDDP细胞顺铂耐药性的影响.pdf

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1、·d·郑州大学学报(医学版)2014年1月第49卷第1期doi：10．3969／j．issn．1671—6825．2014．O1．002沉默GST．1『r基因表达对EC9706／cDDP细胞顺铂耐药性的影响唐悦，轩小燕，柳璐璐，李敏郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室郑州450001#通讯作者，女，1975年1月生，博士，副教授，研究方向：食管癌防治，E—mail：liminzzu@gmail．corn关键词EC9706／eDDP细胞；耐药；谷胱甘肽S转移酶一耵；RNA干扰中图分类号R735．1摘要目的：观察沉默谷胱甘肽s转移酶一订(GST一1T)基因的表达对食管鳞状细胞癌顺铂耐药细胞系

2、EC9706／cDDP细胞耐药性的影响。方法：构建靶向GST一基因的siRNA重组慢病毒GSTsil、GSTsi2和无义对照GSTsiC，转染EC9706／cDDP细胞。通过RT—PCR及Westernblot法检测GSTsil、GSTsi2和GSTsiC感染前后EC9706／cDDP细胞中GST一1TmRNA和蛋白的表达；MTT法检测感染GSTsi2、GSTsiC与未感染的EC9706／cDDP细胞对顺铂敏感性的变化。结果：感染GSTsil、GSTsi2后EC9706／cDDP细胞GST一耵mRNA的表达下调(F=3．490，P<0．001)，其蛋白表达也减弱。感染GSTsi2的EC970

3、6／cDDP细胞对顺铂的耐药指数较感染GSTsiC和未感染的EC9706／cDDP细胞降低(F=50．510，P<0．001)。结论：沉默GST一基因的表达可降低EC9706／cDDP细胞的顺铂耐药性。EffectofGST一，rrexpressionandmechanismsofreversingdrug—resistanttoEC9706／cDDPofesophagealcancercellsTANGYue，XUANXiaoyan，LIULulu，LIMinDepartmentofMicrobiologyandImmunology，ZhengzhouUniversity，Zhengzho

4、u450001KeywordsEC9706／cDDPcell；drug—resistant；glutathioneS-transferase一耵；RNAinterferingAbstractAim：ToobservetheeffectsofsilencingtheexpressionofGST一可O1thedrug—resistanceofesophagealear—einomacells．Methods：ThelentivirusofsiRNAtargetingtoGST．1Twasconstructed．EC9706／cDDPcellswereinfeetedbythelentiviru

5、snamedGSTsil．GSTsi2．ThemRNAandproteinexpressionsofGST一竹beforeandafterinfectionweremeasuredbyRT—PCRandWesternblot．Cellsweredividedintofourgroups：cellsinfectedwithGSTsi2，GSTsiC，untreat-edEC9706／eDDPandEC9706．DrugsensitivitytocDDPwasdeterminedbyMTT．Results：TheexpressionlevelofGST-mRNAincellsinfectedby

6、GSTsilandGSTsi2werelowerthanthoseincontrolcells(F=3．490，P<0．001)，andtheex—pressionofGST-'iTproteinwasalsodecreased．ComparedwithuntreatedEC9706／cDDPandEC9706／cDDPinfectedbyGSTsiC，theresistanceindexofEC9706／cDDPinfectedbyGSTsi2decreased(F：50．510，P<0．001)．Conclusion：Si-lencingtheexpressionofGST一byRNAi

7、canpartlyreversethedrugresistanceofEC9706／cDDP．97[7]曹洁，杨朝霞，沈薇，等．内质网应激在软脂酸钠诱导的[5]WalterP，RonD．Theunfoldedproteinresponse：from脂肪变性L02肝细胞凋亡中的作用[J]．第军医大学stresspathwaytohomeostaticregulation[J]．Science，学报，2011，3