视黄酸促进限定性内胚层细胞向胰腺前体细胞分化-论文.pdf

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1、第23卷第2期激光生物学报ACTALASERBIOL0GYSINICAVol_23NO．22014年4月Apr．2014doi：10．3969／j．issn．1007—7146．2014．02．007视黄酸促进限定性内胚层细胞向胰腺前体细胞分化李进，贺菁菁，林戈，卢光(1．中南大学生殖与干细胞研究所，湖南长沙410078；2．人类国家干细胞工程研究中心，湖南长沙410078)摘要：研究视黄酸(RA)在限定性内胚层细胞向胰腺前体细胞诱导过程中的最佳作用方式。在无饲养层培养体系下联合多因子分阶段诱导经历10天时间获得胰腺前体细胞。获得的细胞不仅表达胰腺前体细胞的标记pdxl，但是也同

2、时表达肝脏前体细胞的标记afp。有研究表明在胰腺特化过程中RA能起到抑制afp的作用，因此在不同的时间点添加RA并持续不同的作用时间来调节内胚层细胞向肝胰分化的命运。收集d7到dl0的细胞用免疫组化和RT—PCR检测pdxl和afp的表达情况。结果显示RA从d3开始持续作用到dlO可以获得更高的pdxl阳性细胞同时能有效的抑制afp的表达，并且在d9可以获得最高比率的pdxl阳性细胞，提示RA持续作用促进限定性内胚层细胞向胰腺前体细胞分化。关键词：人胚胎干细胞；胰腺前体细胞；RA；pdxl中图分类号：Q813．1文献标识码：A文章编号：1007—7146(2014)02-0134

3、-06RetinoicAcidPromotesPancreaticPrecursorCellsDiferentiationFromDefinitiveEndodermCells￡，Jin'’HEJingjing一，LINGe一．LUGuangxiu'(I．[nstituteofReproductiveandStemCellEngineering，CentralSouthUniversity，Changsha410078，Hunan，China；2．NationalResearchandEngineeringCenterofHumanStemCeils，Changsha410078

4、，Hunan，China)Abstract：Toeonfil3pathebesteffeetivetimewindowofRAintheprogressofinducingdefinitiveendodermintopancrc—aticprecursorcel1．Combinedmultiplefactorsandstepstageintroductionmethod，pancreaticprecursorcellscouldbeobtainedwithin10daysunderfeederfreeculturesystem．Thecellsnotonlyexpressthep

5、ancreaticprecursormarkerpdxl，butalsoexpresstheliverprecursormarkeratp．SomestudieshaveshownthatRAcansuppressalpexpressioninpancreaticspecializationprocess，SORAwasaddedatdifferenttimeandlastfordifferentdaystoadjusttheliverandpancreasdifferentiationfromendodermcells．Thecellsfromday7today10wereco

6、llectedtotesttheexpressionofpdxlandafvbvimmunofluorescenceandRT—PCR．ThemethodtreateddefinitiveendodermwithRAfromday3today10whichcouldmakeUSobtainthehigherpositiveofpdxlcellsandatthesametimesuppresstheexpressionofalpeffec—tivelv．andwhichcouldmakeUSobtainthehighestpdxlcellsonday9．Itsuggestedtha

7、tpersistentRApromotespancre一收稿日期：2014-03—10；修回日期：2014-03-29基金项目：“973”项目(2011CB964900)；国家自然科学基金项目(30800659)作者简介：李进(1982一)，男，湖北恩施人，博士研究生，主要从事人胚胎干细胞诱导分化研究。(电话)13574814994；(电子邮箱)lijin0818@yahoo．COIn通讯作者：卢光瑗(1939一)，女，湖北天门人，中南大学教授，博士导师，主要从事生殖与干细胞特性