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《克氏肺炎杆菌NiFe-氢酶基因的克隆与序列分析.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、!"卷#期生物工程学报&’()!"*’)#!$$%年#月!"#$%&%’()*$+,(-.#(/%0"$(,(12+,-.,/0!$$%!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!克氏肺炎杆菌!"#$%氢酶基因的克隆与序列分析&’()")*+),-$./$)0$1)+’23"3(456$7$)$8)0(,")*!"#$%62,9(*$)+3$49(:!"#$%&#""’()#*+,)&’#刘飞，方柏山"QRSG24,-6G7*TU,4L>C,-"工业生物技术福建省高等学校重点实验室（华侨大学），
2、泉州""()"B7QLV软件对>D499LW/’:蛋白数据库中已报道的*4G2L氢酶大亚基氨基酸序列进行比对分析，找到保守区并根据此设计兼并引物。利用其中一对引物进行WH1得到一条大小约为#$$$@=的X*7序列，并根据此序列设计引物进行反向WH1得到整个*4G2L氢酶的序列。再利用生物信息学软件对此氢酶的序列进行二、三级结构预测及大小亚基的对接（6’3E4-8）。结果表明克氏肺炎杆菌的*
3、4G2L氢酶属于一类膜结合放氢酶（N3C氢酶）。关键词克氏肺炎杆菌，*4G2L氢酶，序列分析，结构预测，分子对接中图分类号Y%K文献标识码7文章编号#$$$L"$<（#!$$%）$#L$#""L$M1;359+05X282-2/,:2WH1=/4?2/9D2/262948-26@0?.(:4=(2,(48-?2-:’F:C2=/’:24-92P.2-329’FE-’D-9:/.3:./,(82-292-3’64-8:C23,:,(0:439.@.-4:9’F*4G2LC06/’82-,929’@:,4-26F/’?>D499LW/’:W/’:24->2P.2-32X,:,@,
4、92:C/’.8CHQS>B7QLV9’F:D,/2,-63’?=,/26F’/3’-92/52692P.2-32?’:4F9)7-,?=(4F426WH1=/’6.3:#E@4-94Z2D,9’@:,4-26F/’?:C282-’?43X*7’F5,%7&#%,,+?$%)@($#+%.94-8,92:’F6282-2/,:2=/4?2/9，,-6:C2-4-52/92WH1:23C-4P.2D,9.926:’’@:,4-:C2F.((C06/’82-,923’64-8/284’-)7=/2643:26923’-6,/09:/.3:./2,-6"X9:/.3:./,(?’6
5、2(D2/23’-9:/.3:26@0C’?’(’80?’62(4-8,-66’3E4-8)[-:C2@,949’F:C292/29.(:9，4:D,94-F2//26:C,:*4G2LC06/’82-,92F/’?5,%7&#%,,+?$%)@($#+%@2(’-89:’:C2?2?@/,-2L@’.-6!25’(54-8C06/’82-,928/’.=（N3CC06/’82-,928/’.=）)<$2=(9,35,%7&#%,,+?$%)@($#+%，*4G2LC06/’82-,92，92P.2-32,-,(0949，9:/.3:./2=/2643:4’-，6’3E4-
6、8氢气是一种洁净能源，目前各种制氢方法被广是一种复杂的酶，它的合成需要很多基因的参与。泛研究。生物制氢与其它方法相比具有污染少等优氢酶主要包括两类：*4G2L氢酶和G2L氢酶。已经在点，其研究主要集中在光合微生物和发酵微生很多肠细菌中发现*4G2L氢酶，但是对于克氏肺炎杆［#，!］物。氢气的产生是产氢微生物在氢酶的作用下菌还没有*4G2L氢酶的报道。克氏肺炎杆菌可以发［;］消耗掉多余电子的一种特殊机制。对氢酶表达的研酵生产氢气，其速率和得率都较高，据此可以推断［"］［I］［M］究主要集中在好氧菌、蓝细菌、光合细菌、根该菌也可能含有*4G2L氢酶。如果能得到该菌氢酶［<］［%］
7、［K］瘤菌、硫酸盐还原菌和厌氧发酵细菌。氢酶的基因序列，将会在分子水平上推动对该菌氢气产12324526：7.8.9:!;，!$$<；7332=:26：>2=:2?@2/!%，!$$342-32G’.-6,:4’-’FHC4-,（*’)!$!%<$!<,-6!$II<$$I）)"H’//29=’-64-8,.:C’/)B2(：JK
