中国水仙叶绿体ATP合成酶基因NtATPF的克隆与序列分析.pdf

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1、福建农业学报29(6)：546～549，2014FujianJournalofAgriculturalSciences文章编号：1008—0384(2014)06—546—04林江波，王伟英，邹晖，等．中国水仙叶绿体ATP合成酶基因NtATPF的克隆与序列分析EJ]．福建农业学报，2014，29(6)：546—549．LINJ-B，WANGW—Y，ZOUH，eta1．CloningandSequenceAnalysisofChloroplastATPSynthaseGeneNtATPFfromNarcissustazettavar．Chinensis[J]．FujianJourn

2、alofAgriculturalSciences，2014，29(6)：546—549．中国水仙叶绿体ATP合成酶基因NTPF的克隆与序列分析林江波，王伟英，邹晖，李海明，吴水金，戴艺民(福建省农业科学院甘蔗研究所，福建漳州363005)摘要：以多效唑诱导中国水仙的抑制差减杂交文库(SSH)获得的cDNA片段为基础，采用RACE及RT-PCR技术，分离克隆到1个ATP合成酶CB亚基基因NtATPF。此基因包含有1个555bp完整阅读框架(ORF)，编码184个氨基酸，具有1个跨膜区域(27~49)，分子量为20．8095kD，理论等电点为5．69。聚类分析表明：其氨基酸序列与葱的

3、叶绿体ATP合成酶CF。B亚基蛋白氨基酸序列亲缘关系最近。关键词：中国水仙；ATP合成酶；基因克隆中图分类号：S682文献标识码：ACloningandSequenceAnalysisofChloroplastATPSynthaseGeneNtATPFfromNarcissustazettavar．ChinensisLINJiang—bo，WANGWei—ying，Z0UHui，LIHal—ming，WUShui—jin，DAIYi-min(SugarcaneResearchInstitute，FujJanAcademyofAgriculturalSciences，Zhangzh

4、ou，Fujian363005，China)Abstract：BasedonafragmenteDNAfromsuppressionsubtractivehybridization(SSH)ofNarcissustazettavar．chinensisinducedbypaclobutrazol，anATPSynthaseCF0subunitgeneNATPFwasseparatedandclonedbyRACEandRT—PCR．ThefulllengthofNtATPFcDNAwas905bpwitha555bpORF，whichencodedaproteinof184ami

5、noacidsandhadatransmembrancedomain(27—49)withapredictedmolecularmassof20．8095kDandtheoreticalisoelectricpointof5．69．PhylogeneticanalysisshowedthatNtATPFhadcloserelationshiptoATPSynthaseCFosubunitinAlliumfistulosum(AEX93661．1)．Keywords：Narcissustazettavar．Chinensis；ATPsynthase；genecloningATP是细

6、胞进行各种生命活动的直接能源，生叶绿素a／b结合蛋白基因Ntcabl在抽葶期和始花物体需要不断得到能量来维持其一系列的代谢活期的表达量提高]、叶绿体结构更为完整清晰，光合动。FF。一型ATP合成酶是能量转变过程中一个关速率、光合／呼吸比率提高]。本课题组从多效唑键酶，由嵌合于类囊体膜内的F。和突出于膜表面的诱导中国水仙的抑制消减文库(SSH)获得了1个较亲水的F两部分组成。F部分是由a。、G。、了、8和ATP合成酶F。B亚基的cDNA片段，本研究根据e亚基组成，F。部分是由a、b和C亚基组成_1]。F已获得的cDNA片段克隆该基因全长eDNA，并对F。一型ATP合成酶存在于真、细

7、菌细胞膜、线粒体该基因进行了生物信息学分析，为进一步研究该基膜和叶绿体类囊体膜上，利用跨膜的质子梯度使因功能及分析多效唑矮化中国水仙的分子机理奠定ADP和无机磷建立共价键而形成ATP【2]。有关中基础。国水仙ATP合成酶基因还未见有相关报道。1材料与方法多效唑能使中国水仙植株矮化，株形紧凑，解决室内水养时由于光线弱而引起叶片徒长的问题，提1．1材料高观赏价值_3]。适宜浓度的多效唑可使中国水仙中国水仙“金盏银台”商品球购自福建省龙海市收稿日期：2014—01—12初稿；2014—