亚心型扁藻叶绿体psbA基因的克隆及序列分析.pdf

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1、第31卷第1期生物学杂志Vo1.3lNo.12014年2月JOURNALOFBIOLOGYFeb,2014doi:10.3969/j.issn.2095—1736.2014.O1.001亚心型扁藻叶绿体psbA基因的克隆及序列分析侯士昌,崔玉琳,温少红,唐志红,秦松(1.烟台大学生命科学学院,山东烟台264003;2.中国科学院烟台海岸带研究所,山东烟台264003)摘要:基因是叶绿体基因组中一个重要的光调控基因,编码光和系统Ⅱ反应中心的D1蛋白。根据叶绿体基因组序列高度保守的特性,利用菜茵衣藻(Chlamydomonasreinhardtii)psbA基因的保守序列(基

2、因登录号:HQ667991.1)设计引物,采用PCR步移的方法从亚心型扁藻(Platymonassubcordiformis)基因组DNA中克隆到psbA基因全长(基因登录号:KF528742)。序列分析表明,亚心型扁藻psbA基因全长1939bp,编码区长度为1062bp,推导编码353个氨基酸,包括4个赖氨酸残基。有效密码子数显示psbA基因具有明显的密码子偏好性,并且偏好使用以A/T结尾的密码子。相对同义密码子使用度表明25个密码子在编码使用时具有偏好性,其中20个密码子以A/T碱基结尾.占到80%。其终止密码子使用了TAG。关键词:亚心型扁藻(Platymonas

3、subcordiformis);PCR步移;psbA基因;序列分析中图分类号:Q943.2文献标识码:A文章编号:2095~1736(2014)01—0001—04CloningandsequenceanalysisofpsbAgenefragmentfromthechloroplastofPlatymonassubcordiformisHOUShi—chang,CUIYu.1in,WENShao.hong,TANGZhi—hong,QINSong(1.CollegeofLifeSciences,YantaiUniversity,Yantai264003;2.Yantai

4、InstituteofCoastalZoneResearch,ChineseAcademyofSciences,Yantai264003,China)Abstract:ThepsMgenecodingforD1proteininphotosyntheticⅡreactioncentreisoneoftheimportantlight—regulatedgenesinthechloroplastgenome.AccordingtoconservedmotifofthehomologousnucleotidesequenceofpsMofChlamydomonasreinha

5、rdtii(Gen·Bankaccessionnumber:HQ667991.1)byusinggenomewalking,1939bpfragmentwasamplifiedfromthegenomeofPlatymonassub—cordiformis(GenBankaccessionnumber:KF528742).Resultsshowedthatthecodingregionhad1062bpand353aminoacidswerededucedincluding4lysines.Theeffectivenumberofcodonsshowedthatcodon

6、biasexistedinthepsbAgene.ThecodonsendingwithA/Twerefrequentlyused.Synonymouscodonusageanalysisshowedthat25codonswerepreferredbythepsbAgenecodingDNAse—quenee(CDS),and20codonsendingwithA/T,accountingfor80%oftheentireCDS.TheterminatorcodonwasTAG.Keywords:Platymonassubcordiformis;genomewalkin

7、g;gene;sequencinganalysis亚心型扁藻(Platymonussubcordiformis)是一种海动物育苗中广为应用。此外,亚心型扁藻在药用研洋产的单细胞浮游藻类,属衣藻科、扁藻属。亚心型扁究]、化合物毒性评估及光合放氢等方面同样具藻因具有适应能力强,繁殖速度快,适口性好,必需氨有广阔的开发空间。基酸含量高及自身能够合成并富集高浓度多不饱和脂psbA基因是光合作物叶绿体基因组中的一个重要肪酸(polyunsaturatedfattyacids,PUFA)⋯等特点,是光调控基因,编码光系统Ⅱ反应中心的核心蛋

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