蓖麻PsbO基因的克隆与序列分析.pdf

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1、第28卷第4期内蒙古民族大学学报(自然科学版)V01．28No．42013年7月JournalofInnerMongoliaUniversityforNationalitiesJu1．2013蓖麻PsbO基因的克隆与序列分析霍红雁(内蒙古民族大学生命科学学院，内蒙古通辽028043)[摘要]用实验室栽培的蓖麻新鲜叶片为材料，Trizol法提取总RNA，参照GenBank公布的植物PsbO氨基酸序列，进行序列比对找出氨基酸序列保守区设计简并引物，通过RT—PCR扩增目的片段，纯化后克隆到T—Vector中测序，获得蓖麻的

2、PsbO基因，对其基因序列进行分析．了解到其长度为1081bp，5’非编码区为10bp，3’非编码区为273bp，编码区长798bp，编码266个氨基酸．序列分析结果表明，蓖麻PsbO基因编码的氨基酸序列与已公布的其他植物中克隆到的PsbO氨基酸序列有较高的同源性．、[关键词]蓖麻；PsbO基因；克隆；序列分析[中图分类号]Q78[文献标识码]A[文章编号)1671—0185(2013)04—0420—04CloningandSequenceAnalysisofPsbOfromCastorHUOHong—yan(Col

3、legeofLifeScience，InnerMongoliaUniversityforNationalities，Tongliao028043，China)Abstract：Inthestudy．1eavesofcastorcultivatedinthelaboratorywereusedasmaterialsthenextractedthetotalRNAbyTrizolmethod．Theprimerwasdesignedthroughtheconservativeaminoacidsequencesofknow

4、nplantPsbO．Pu卜posefragmentwasamplifiedwithRT—PCR，thenclonedintoT—Vectorandsequenced．Theresultsasfo-llows：thelengthofclonedPsbOwas1081bp，5’noncodingregionwas10bp，3’noncodingregionwas273bpandcodingregionwas798bp，itcouldencode266aminoacids．Theresultsofsequencecompa

5、risonindicatedthattheaminoacidsse-quenceofPs60fromcastorshareshiShsequencehomologywiththeselectedPsbOaminoacidsofotherplants．Keywords：Castor；PsbOgenes；Cloning；SequenceAnalysis蓖麻(RicinuscommunisL．)是大戟科蓖麻属一年生或多年生的草本植物“，原产于非洲，我国各地均有栽培，种子含油可达70％，是重要的工业用油原料，可制润滑油、肥皂及

6、印刷油等，在医药上可用作缓泻剂；根、茎、叶和种子均可入药，有祛湿通络、消肿拔毒之效；叶可饲养蓖麻蚕，．近年来人类不仅局限于蓖麻种植面积和总产量的提高，而且开始从微观领域重视和研究提高蓖麻产量的方法．光合作用是光和生物利用光能，同化CO：和H0合成有机物，释放O：的过程0]，是影响绿色植物产量的主要因素，提高光合作用效率是解决蓖麻产量的主要途径．植物进行光合作用的主要场所为叶绿体，其内部由基质和类囊体组成，类囊体是植物进行光合作用的关键部位．类囊体膜包含多种蛋白复合体，主要包括四类“：光系统I(PsI)，光系统Ⅱ(PsⅡ

7、)，cy—tb6／f复合体以及ATP合酶．PsⅡ复合体是进行光合作用原初反应的重要场所，主要功能是吸收光能启动光合电子传递链和裂解水释放氧气．PSⅡ复合体的蛋白质组分主要包括PsⅡ反应中心蛋白、PsⅡ天线蛋白、捕光色素蛋白复合体(LHC)、水氧化放氧系统(表观分子量为33kD、23kD及17KD~种放氧复合体外周蛋白及与放氧有关的锰簇和氯与钙离子组成)．在PSII结构和功能研究中，光合放氧是一个重要的研究方向，放氧系统中33kD蛋白与放氧关系最密切，有稳定锰簇的作用，又称锰簇稳定蛋白(MSP)(11,12)．锰簇的稳定

8、与否对PsⅡ的光抑制产生活性氧的过程有重要影响．MSP是由核基因PsbO所编码，但目前国内外对PsbO基因的报道较少，其具体功能尚未进行广泛深入研究(131．本文以蓖麻为材料，克隆出PsbO基因序列，为研究PsbO基因的表达及其功能的分析奠定基础．基金项目：国家自然科学基金项目(31260336)作者简介：霍红雁，内蒙古民族大学生