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《猪胸膜肺炎放线杆菌16srdna基因的克隆及序列分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、猪胸膜肺炎放线杆菌16SrDNA基因的克隆及序列分析湖南农业科学2011,(15):154～156,161HunanAculturalSciences猪胸膜肺炎放线杆菌16SrDNA基因的克隆及序列分析沈萍,王喜军(1.湖南生物机电职业技术学院动科系,湖南长沙410127;2.长沙市动物防疫监督站,湖南长沙410012)摘要:为了阐明猪胸膜肺炎放线杆菌16SrDNA基因的遗传变异情况,选择猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacilluspleuropneumoniae,APP)的16SrDNA基因设计引物,应用聚合酶链反应(PCR)扩增
2、APP的16SrDNA基因的部分序列,将该产物克隆到pMD18一T载体上,重组质粒通过菌落PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定并进行序列分析.结果表明:本研究得到的长沙(cs)株与血清3,5,7型同源性为99.4%～99.6%,与李氏放线杆菌,脲放线杆菌,马驹放线杆菌,荚膜放线杆菌同源性分别为97.8%,96.3%,97.3%,96.3%.该结果为APP分子流行病学调查,亲缘性关系的研究提供了依据,同时为APP的监控奠定了基础.关键词:猪胸膜肺炎放线杆菌;16SrDNA基因;克隆及序列分析中图分类号:S185文献标识码:A文章编号:10
3、06—060X(2011)15—0154—03CloningandSequenceAnalysisof16SrDNAGeneofActinobacilluspleuropneumoniaeSHENPing',WANGXi—iun(1.DepartmentofanimalScience,HunanBiological&ElectromechanicalPolytechnic,Changsha410127,PRC;2.ChangshaAnimalEpidemicPreventionandSuperviseStation,Changs
4、ha410012,PRC)Abstract:Thisstudyaimedtoclarifythegeneticvariationsituationof16SrDNAofAetinobacilluspleuropneumoniae(APP).The16SrDNAgeneofAPPwasselectedtodesignprimers,thepartialsequencesof16SrDNAgeneofAPPwereamplifiedbyusingpolymerasechainreaction(PCR),andtheobtainedprodu
5、ctswereclonedintopMD18一Tvector.AftertherecombinantplasmidswereidentifiedbycolonyPCR,thepositivecoloniesweresequencedandanalyzed.TheresultsshowedthatthehomologybetweenobtainedChangshastrain(CS)andserum3,5,7typewas99.4%-99.6%;thehomologybetweenCSandActinobacilluslignieresi
6、i,Actinobacillusurea,Actinobacillusequuli,Actinobacilluscapsulatuswas97.8%,96_3%,97-3%,96_3%,respectively.TheseresultsprovidebasisforstudiesonmolecularepidemiologyandphylogeneticrelationshipofAPP,aswellaslaidthefoundationformonitoringAPP.Keywords:Actinobacilluspleuropneu
7、moniae(APP);16SrDNAgene;cloningandsequenceanalysis猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)为革兰氏阴性杆菌,可引起猪传染性胸膜肺炎(porcinecontagiouspleuropneumoniae,PCP),该病由Pattison首次报道,现已在美国,墨西哥,瑞士,丹麦,澳大利亚,加拿大,泰国,韩国,日本等国家广泛流行【-21;该病在我国也早已广泛存在,并有扩大蔓延之势.APP血清型较多,我国猪场中存在的就有3,5,7,8,10型,其中以3型和7型为最多_3I.发病时,病猪出现心衰和循环障碍,精神
8、委顿,食欲废绝;晚期出现严重的体温下降和呼吸困难;临死前从嘴,鼻孑L流出血性泡沫样液体.病猪于发病后24—36h内死亡,死亡率高达80%-100%.16SrRNA为原核生物的一种核糖体RNA,在收稿日期:2
