当归总黄酮提取方法比较及工艺条件优化_刘芳

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1、第27卷第6期四川理工学院学报(自然科学版)Vol.27No.62014年12月JournalofSichuanUniversityofScience＆Engineering(NaturalScienceEdition)Dec.2014文章编号:1673-1549(2014)06-0005-04DOI:10．11863/j．suse．2014．06．02当归总黄酮提取方法比较及工艺条件优化刘芳，杨跃寰，杨王霖(四川理工学院生物工程学院，四川自贡643000)摘要:对当归总黄酮进行提取，比较其提取方法，优化其最适提取方法的工艺条件。试验分别采用水煎煮法、乙醇回流法、超声波提取法对当归总

2、黄酮进行提取，采用亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠法测定总黄酮含量，采用正交试验优化提取工艺条件。试验结果表明:乙醇回流法为当归总黄酮的最适提取方法，当提取温度85℃、提取时间2．0h、料液比1∶30、乙醇浓度80%时，得当归总黄酮含量为-110．066mg·g，比优化前提高了59．52%。试验较为完整地对当归总黄酮的提取方法和提取条件进行了研究，可为开发和利用当归总黄酮提供理论依据。关键词:当归;总黄酮;提取中图分类号:Ｒ284.2文献标志码:A1.1.2主要设备及仪器引言DK－98－1水浴锅:天津市泰斯特仪器有限公司;当归(Angelicasinensis)的化学成分主要有多糖类、ＲE

3、52CS/B－220旋转蒸发仪:上海亚荣生化仪器厂;苯酞类、香豆素类、阿魏酸钠、黄酮类、挥发油类化合物UP400S手提式超声波细胞粉碎机:宁波新芝生物科技［1-2］及其他成分。研究表明，从当归中分离到的黄酮类股份有限公司;WFJ7200紫外可见风光光度计:上海无化合物具有抑制NO生成、抗氧化和抑菌杀菌等作尼柯仪器有限公司;回流装置、圆底烧瓶、容量瓶、移液［3-5］用。黄酮类化合物的提取方法众多，主要有溶剂提管、试管等:均为微生物实验室常规仪器。取法、微波提取法、超声波提取法、酶解法、超临界流体1.2方法［6-10］萃取法、双水相萃取分离法、半仿生提取法等。日前1.2.1当归总黄酮提取

4、液的制备［4］已有研究者开始探索当归总黄酮提取工艺，如王芙蓉、水煎煮法:称取1g当归粉于圆底烧瓶，加入25mL［5］李谷才等，但均采用醇提法。本研究分别采用水煎煮蒸馏水于其中，浸泡20min后，保持沸腾回流1h，冷却法、乙醇回流法、超声波提取法对当归总黄酮进行提取，比后抽滤得滤液，滤渣再次加入25mL蒸馏水浸泡20min较其提取方法，优化其最适提取方法的工艺条件，旨为进后沸腾回流1h，冷却抽滤，合并滤液。将滤液旋转蒸发一步开发和利用当归总黄酮提供理论依据。浓缩至仅剩5mL，转入100mL容量瓶中，用60%乙醇稀释定容至刻度，得提取液。1材料与方法乙醇回流法:采用75%的乙醇，提取温度

5、70℃，其1.1材料他方法和条件同水煎煮法。1.1.1原料与试剂超声波提取法:超声波功率50W，其他方法和条件［11］当归粉:市售;其他试剂:均为分析纯。同乙醇回流法。收稿日期:2014-09-26基金项目:四川省教育厅自然科学重点项目(11ZA260);四川省大学生创新创业训练计划项目(201410622024)作者简介:刘芳(1966-)，女，四川自贡人，教授，主要从事食品微生物方面的的研究，(E-mail)sy5162524@sina．com6四川理工学院学报(自然科学版)2014年12月1.2.2提取液中总黄酮含量的测定其提取条件。采用亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠法测提取液中2

6、.3单因素试验［5］总黄酮含量，用芦丁标准品绘制标准曲线，按标准曲乙醇回流提取过程中，对提取效果影响较大的因素线制备步骤操作，测定提取液的吸光度，根据吸光度在主要有乙醇浓度、料液比、提取温度和提取时间等。以芦丁标准曲线上查找对应的芦丁浓度，计算出提取液总乙醇浓度75%、料液比1∶25、提取温度70℃、提取时间黄酮浓度。1g当归中所含总黄酮量计算公式为:1h为初始提取条件。-1C×1002.3.1乙醇浓度对提取液中总黄酮含量的影响总黄酮含量(mg·g)=m分别测定乙醇浓度为70%、75%、80%、85%、90%、-1式中:C—总黄酮浓度(mg·mL)95%时当归总黄酮含量，其他因素为初

7、始水平。测定结100—提取液的总体积(mL)果如图2所示。m—提取所用原料质量(g)1.2.3当归总黄酮最适提取方法的确定比较水煎煮法、乙醇回流法、超声波提取法提取液中总黄酮含量，确定出当归总黄酮的最适提取方法。1.2.4最适提取方法工艺条件的优化通过单因素试验和正交试验，对最适提取方法的工艺条件进行优化，确定出最佳工艺参数。图2乙醇浓度对总黄酮含量的影响1.2.5验证试验由图2可知，随着乙醇浓度的增加，当归总黄酮含考察最佳工艺的稳定性和合理性，在优化组合