山药中黄酮提取工艺优化

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1、山药中黄酮提取工艺优化摘要：采用热浸提法提取山药（Ｄｉｏｓｃｏｒｅａｂａｔａｔａｓ）中的黄酮，在单因素试验的基础上设计正交试验探讨乙醇体积分数、浸提时间、浸提温度和料液比对黄酮提取率的影响。结果表明，优化后的试验条件为体积分数７０％的乙醇作为提取剂，料液比１∶２０（m：V，g/mL），在５０℃提取１２０ｍｉｎ。关键词：山药（Ｄｉｏｓｃｏｒｅａｂａｔａｔａｓ）；黄酮；热浸提法；优化中图分类号：Ｓ５３１．９；Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０12）17－3824-03ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅＥｘｔｒａｃｔｉｏｎＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｆＦｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍＣｈｉｎｅｓｅ

2、ＹａｍＺＨＯＵＨｏｕ－lｉａｎｇ，ＷＡＮＧＬｉａｎg－jｉａｎ，ＸＩＥＬｉｎｇ－lｉ（ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＹａｎｇｔｚｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉｎｇｚｈｏｕ４３４０２５，Ｈｕｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎＣｈｉｎｅｓｅｙａｍ（Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ5ｂａｔａｔａｓ）ｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙｈｏｔｌｉｘｉｖｉａｔｉｏｎ．Ｌ９（３４）ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｄｅｓｉｇｎｗａｓａｐｐｌｉｅｄｂａｓｅｄｏｎｓｉｎｇｌｅｆａｃｔｏｒｔｅｓｔｓｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｆｒａｃｔｉｏｎofｅｔｈａｎｏｌｖｏｌｕｍｅ，ｅｘｔｒａｃｔｉｏ

3、ｎｔｉｍｅ，ｌｉｑｕｉｄｔｏｓｏｌｉｄｒａｔｉｏａｎｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｏｎｔｈｅｙｉｅｌｄｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｆｏｒｅｘｔｒａｃｔｉｎｇｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｗｅｒｅ，ｖｏｌｕｍｅｆｒａｃｔｉｏｎｏｆｅｔｈａｎｏｌ，７０％；ｓｏｌｉｄｔｏｌｉｑｕｉｄｒａｔｉｏ１∶２０（m：V，g/mL）；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ，１２０ｍｉｎ；ａｎｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，６０℃．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｈｉｎｅｓｅｙａｍ（Ｄｉｏｓｃｏｒｅａｂａｔａｔａｓ）；ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｈｏｔ

4、ｌｉｘｉｖｉａｔｉｏｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔ山药为薯蓣科多年生宿根蔓草植物山药（Ｄｉｏｓｃｏｒｅａ5ｂａｔａｔａｓ）的块根，营养价值高，有些品种还有较高的药用价值，是良好的滋补强壮剂，对肾脾病、糖尿病、慢性肠炎等有辅助疗效，也是重要的出口特产蔬菜之一［１］。黄酮类化合物是药用植物的主要活性成分之一，相关药理和临床实验证实，黄酮类化合物具有广泛的药理功能，如不少治疗冠心病的中草药或活血化瘀类中药中均含有黄酮类化合物芦丁、槲皮素、葛根素等；染料木素、金雀花异黄酮、大豆甙元等具有雌性激素样作用［２，３］。本试验采用热浸提法提取山药中的黄酮，通过单因素试验和正交设计考察乙醇体积分数、浸提时间、

5、料液比、浸提温度对黄酮提取率的影响，为山药黄酮的利用奠定基础。１材料与方法１．１试验材料及试剂材料：山药，市售。选择新鲜、无霉点、无腐烂、粗细均匀的山药去皮清洗干净，切成小块，于８５℃烘干后用粉碎机粉碎，过６０目筛，得山药粉。主要试剂芦丁、亚硝酸钠、无水乙醇、硝酸铝和氢氧化钠等试剂均为分析纯。１．２试验方法１．２．１单因素试验采用热浸提法提取山药中的黄酮，设置单因素试验分别考察乙醇体积分数、浸提时间、料液比、浸提温度对黄酮提取率的影响。①乙醇体积分数。称取１5ｇ山药粉５份，分别加入５０％、６０％、７０％、８０％、９０％的乙醇（体积分数，下同）２０ｍＬ，于５０℃浸提２ｈ，５０００ｒ／ｍｉｎ离心１

6、０ｍｉｎ，取上清液定容到５００ｍＬ。②浸提时间。称取１ｇ山药粉５份，加入２０ｍＬ６０％的乙醇，６０℃下分别提取４０、８０、１２０、１６０和２００ｍｉｎ。③料液比。称取１ｇ山药粉５份，分别按１∶１０、１∶１５、１∶２０、１∶２５、１∶３０的料液比（ｍ∶Ｖ，ｇ／ｍＬ，下同）加入８０％的乙醇，于６０℃浸提２ｈ。④浸提温度。称取１ｇ山药粉５份，加入２０ｍＬ８０％的乙醇，分别置于４０、５０、６０、７０和８０℃温度条件下浸提２ｈ。１．２．2正交试验根据单因素试验结果，采用Ｌ９（３４）正交试验进一步考察乙醇体积分数、浸提时间、料液比和浸提温度４个因素对黄酮提取率的影响，正交试验因素与水平见表１。１．２．3黄

7、酮含量的测定［４－８］①芦丁标准曲线的制作。准确称取１０５℃下干燥至恒重的芦丁标准品１００ｍｇ，定容于１Ｌ容量瓶中，得浓度为０．１ｍｇ／ｍＬ的芦丁标准液。精确量取此标准液２．００、４．００、６．００、８．００、１０．００ｍＬ，分别置具塞试管中，加３０％的乙醇补足至１０．００ｍＬ，加５０ｍｇ／ｍＬ亚硝酸钠溶液０．７５ｍＬ，摇匀，静置５5ｍｉｎ。再加０．１ｇ／ｍＬ硝酸铝溶液０．７５ｍＬ，摇匀，静置５ｍ