中药苦参提取方法的比较和工艺条件优化

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1、中药苦参提取方法的比较和工艺条件优化　　关键词：苦参；氧化苦参碱；正交设计；提取工艺　　StudyonDifferentExtractionProcessofOxymatrineinRadixSophoraeFlavescentisandOptimization　　Abstract:ObjectiveTooptimizetheextractionprocessofoxymatrineinRadixSophoraeFlavescentis.MethodsSeveralextractionproces

2、sesethod,therefluxingmethod,leakagingmethod.TheoptimumextractionatrineinedbyHPLC.ResultsTheoptimumextractionconditionsarinating24hoursandthevelocityofflol/min.Thecontentofoxymatrineandextractionandextractionrateizedmethodissimple,stableandefficient.　　

3、Keyatrine;Orthogonaldesign;Extractionprocess　　中药苦参是豆科植物苦参SophoraflavescensAit的干燥根，有清热燥湿，杀虫，利尿之功效。苦参在临床用于杀虫，治疗痢疾、肝炎、荨麻疹、湿疹、气管炎等。药理实验证明，苦参总生物碱有抗心律失常及抗癌活性等。苦参中主要含生物碱和黄酮类成分。苦参中主要生物碱有：苦参碱、氧化苦参碱、槐定、槐果碱。氧化苦参碱有抗癌，抗衰老作用，为了充分利用药材资源，减少浪费，确保临床疗效，本文以氧化苦参碱为考察对象，对苦参

4、的不同提取工艺进行比较，优选出氧化苦参碱的最佳提取工艺。　　1仪器与试药　　岛津LC―3AD型泵；岛津SPD―6A型检测器；苦参饮片(购于同仁堂药店，为豆科植物苦参的干燥根)；氧化苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所)；乙腈为色谱纯；水为注射用水；其余试药均为分析纯。　　2方法及结果　　2.1色谱条件色谱柱：TSKgelODS80Ts(4.6mm×15cm,5μm);柱温：50℃；流动相：含0.042mol/LSDS的1/15mol/L磷酸与1/15mol/L磷酸二氢钾(pH2.0)溶液；乙腈(7

5、40∶260)；流速：1.0ml/min；检测波长：207nm。其色谱见图1。　　2.2标准溶液的制备精密称取氧化苦参碱对照品2mg于5ml容量瓶中，分别用乙腈无水乙醇(8∶1)溶解并定容，混匀，即得标准溶液。　　2.3样品溶液的制备精密称取苦参粉末(过40目筛)0.25g，置于10ml具塞试管中，精密加入氯仿10ml，与氨水0.1ml，密塞，超声波振荡提取，45min过滤，精密吸取滤液7.5ml，通过氧化铝柱，先用氯仿10ml洗脱，再用氯仿甲醇(7∶3)10ml洗脱，合并洗脱液，挥去溶剂，残渣用

6、乙腈无水乙醇(8∶1)溶解并定容5.0ml，即为供试品溶液。　　2.4氧化苦参碱含量测定　　2.4.1线性关系分别吸取上述的标准溶液2.0，4.0，6.0，8.0μl进样，按上述色谱条件测定峰面积，以氧化苦参碱的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，得回归线方程为Y=15482X5333，r=0.9992,结果表明氧化生物碱在10.42～208.41μg之间范围内呈良好的线性关系。　　2.5氧化苦参碱提取工艺优选　　2.5.1苦参提取水煎法：称取苦参粉末10g，水煎2次，均加水100ml/次，并煎煮1h，

7、并合并滤液，静置过滤，滤液浓缩至50ml。乙醇回流法：称取苦参粉末10g，用100ml95%乙醇回流提取氧化苦参碱6h，滤液回收乙醇并浓缩至50ml。　　渗滤法：称取苦参粉末10g，加100ml95%乙醇浸泡24h后进行渗滤，渗滤流速为5ml/min，渗滤液减压回收乙醇浓缩至50ml。　　2.5.2提取方法的比较取在2.3中制备的供试品溶液5～10μl，按2.1条件测定氧化苦参碱含量，测得苦参中氧化苦参碱的含量为1.47%，分别对3种不同方法的浸提物进行含量测定，关于苦参中氧化苦参碱的含量进行比较

8、，结果表明，渗滤法所得浸提物中，氧化苦参碱含量明显高于水煎法和乙醇回流法，故认为渗滤法为氧化苦参碱的最佳提取方法。表13种提取方法的结果比较（略）　　2.5.3苦参渗滤提取最佳工艺确定正交设计表：根据氧化苦参碱的理化性质，考虑到渗滤过程中的浸泡时间，乙醇浓度，溶剂用量，流速等因素对提取的影响，每个因素选择三个水平，以L9(34)正交表进行实验研究，从而优选最佳提取工艺。表2正交设计因素水平（略）　　实验方法及实验数据：准确称取苦参粉末10g，分别根据正交设计因素水平表的实验条件进行