神经干细胞的培养鉴定及分化

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1、神经T•细胞朱琼，女，4990年生，重庆市人，汉族，2009年第三军医大学毕业，在读硕士，主要从爭神经干细胞治疗阿尔茨海默病的作用及机制研究。通讯作者：徐亚丽，博士，副主任医师，副教授，解放军第三军医大学第二附属医院超声科，重庆市400037中图分类号:R394.2文献标识码:B文^^4^:2095-4344(2017)17-02708-06橋件接受：2017-01-10ZhuQiong,Studyingformaster'sdegree,DepartmentofUltrasound,SecondAffiliateHosp

2、italofThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400037,ChinaCorrespondingauthor:XuYa-li,M.D..Associatechiefphysician,DepartmentofUltrasound,SecondAffiliateHospitalofThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400037,China神经干细胞的培养鉴定及分化朱琼S皋月娟2,高顺记S陈重S刘政S徐亚丽T解放军第三军医大学第二附属医

3、院超声科，重庆市400037：2解放军第三O二医院超声科，北京市100039)电用本文.：朱琼，皋月娟,高顺记,陈重,刘政,徐亚丽.神经干细胞的培养鉴泄及分化卜几中国组织工程研究,2017,21(17):2708-2713.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.17.014ORCID:0000-0002-1810-5009(朱琼)文章快速阅读:神经干细胞生物学特征及鉴定光学显微镜观察神经球形态透射电镜观察超微结构MTT法绘制生长曲线免疫荧光检测Nestin蛋白表达流式细胞技术检测细胞周期免疫

4、荧光检测GFAP.pill-tubulin.MBP农达文题释义：神经干细胞：是具冇自我更新和多向分化潜能的原始细胞，主耍存在于侧脑室下区和海马齿状冋颗粒下层，不仅能分化为多种类型的神经細胞替代缺失神经组织，同时能产生多种细胞因子，如脑源性神经营养因子、神经生长因子及胶质源性神经营养因子等，并促进突触发生，调节其可塑性，且能重建部分环路和功能，是神经元替代治疗的理想靶细胞。细胞分化：指同一来源的细胞逐渐由全能到多能，最后到单能，从而产生形态功能不同的细胞群的过程，其本质是基因纟R在时间和空间上的选择性农达。如神经干细胞能分化

5、为多种类型神经细胞：星形胶质细胞、小胶质细胞及神经元。同时该过程受局部微环境调节，多种理化因索嘟能诱导全能细胞产生分化，如血淸诱导神经干细胞分化。摘要背景：神经干细胞在神经损伤修复和退行性疾病中有广泛的应用前杲，体外培养鉴定及促神经元诱导分化是后续研究的基础。目的：采用悬浮神经球培养法分离培养神经干细胞并对其鉴定，了解生物学特性。方法：采用悬浮神经球培养法从C57BL/6胎鼠大脑半球分离培养神经干细胞，观察形态特征及超微结构，CCK-8法绘制生长曲线，流式细胞仪检测细胞周期，免疫荧光法检测特异性标志蛋白Nestin的表达；

6、用体积分数为1%和10%的血清诱导分化后，免疫荧光法检测GFAP、pIH-tubulin和MBP的表达。结果与结论：①体外培养得到悬浮生长的神经球，生长曲线和细胞周期表明细胞增殖力强；②透射电镜观察到神经干细胞核浆比高，呈未分化状态；③Nestin免疫荧光阳性；④不同体积分数的血淸诱导后均可分化为星形胶质细胞、神经元和少突胶质细胞，体积分数为1%血清能诱导分化得到更多的神经元细胞；⑤结果表明,采用悬浮神经球培养法成功分离培养得到了神经干细胞，低体积分数血淸冇利于神经干细胞向神经元分化。关键词：干细胞;分化；神经干细胞;培养

7、;鉴定;血淸;诱导分化;国家自然科学基金主题词：神经干细胞;细胞,培养的；血淸;细胞分化;组织工程基金资助：国家自然科学基金面上项I」(81471795)；全军陕学科技青年培育计划(16QNP102)Cultivation,identificationanddifferentiationofneuralstemcellsZhuQiongHaoYue-juan2,GaoShun-ji1,ChenZhong1,LiuZheng1,XuYa-li1(departmentofUltrasound,SecondAffiliateH

8、ospitalofThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing400037,China;2DepartmentofUltrasound,the302ndHospitalofPLA,Beijing100039,China)AbstractBACKGROUND:Neura