神经干细胞分离培养及其分化潜能研究

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1、中山大学博士学位论文神经干细胞分离培养及其分化潜能研究姓名：胡黎平申请学位级别：博士专业：人体解剖与组织胚胎学指导教师：李海标2003.6.2塑丝王墅堕坌塞堕茭墨基坌些堂堂堕壅一生兰!堕神经干细胞分离培养及其分化潜能研究博士研究生：胡黎平导师：李海标教授中山大学中山医学院组织胚胎学教研室，广州510080摘要神经干细胞具有潜在的分化能力，即能在一定的条件下定向分化，当成体神经组织受损或神经退行性变后，通过定向诱导神经干细胞向相应的神经组织或细胞分化，进而取代损伤组织或细胞成为可能。因此，神经干细胞分化潜能及其

2、分子调控机制是神经生物学的重要课题，希望通过对其深入研究，为神经干细胞的替代治疗打下基础。厂f我们从成年鼠室管膜下区、纹状体和脊髓分离的NSCs，在含bFGF与EGF＼的无血清培养液中，里悬浮集落生长，原代与子代细胞呈nestin阳性，室管膜下区集落形成率最高(O．礁，PO．05)。研究了不同细胞

3、外基质、维甲酸A、dBcAMP和神经生长因子对NSCs分化的影响，结果显示层粘蛋白利于NSCs贴壁和突起的生长，明胶、鼠尾胶原和纤粘蛋白促NSCs向神经元分化率低于对照组(P<0．01)；维甲酸A、dBcAMP和神经生长因子促NSCs向Map2阳性细胞分化率较对照组高(P<0．01)，同时维甲酸A促NSCs向CNPase阳性细胞分化率升高，而dBcA／vIP使NSCs向CNPase阳性细胞分化率降低(P

4、胞的比率(P<0．01)，其促NSCs向神经元分化不受膜特异受体阻制剂Luzindole的影响。用RT—PER技术检测了不同时神经干细胞分离培养及其分化潜能研究中文摘要间，褪黑素对NeuroD、p21和p75基因mRNA的表达的影响，发现NeuroD最先激活，随后是p21和p75表达的上调。此外，我们的实验还表明，将褪黑素诱导后的NSCs移植入PD鼠纹状体内，结果显示NSCs可以存活8周以上，并能分化为神经元和神经胶质细胞，可部分改善PD鼠的行为。7。一一[关键词]神经干细胞；匿多细胞培养：帕金森氏病?IIS

5、tudyontheisolationandthepotentialdifferentiationofneuralstemcellsDoctoralpostgraduate：Supervisor：HuLipingProfessorLiHaibioDepartmentofHistologyandEmbryology,SunYat-senUniversityofmedicalcollege，SunYat．senUniversity,Guangzhou510080AbstractNeuralstemcellshave

6、theabilityofpotentialdifferentiation．suchasdifferentiationorientationundersomeconditions．WhentheadultnervetissueiSdestroyedordegenerate，itispossibletoreplacetheinjurednervetissueorcellswiththehomologousnervetissueorcellsproducedthroughtheorientationinduceme

7、ntofneuralstemcells．Therefore，studyofabilityforNSCspotentialdifferentiationistheimportanttaSkofneurobiology．Expectationbyresearchitmore，tofoundawaytocurethediseaSeswithNSCs．NSCsdissectedfromtheadultsubventricularzone．striatumandspinalcordrespectively,Canpro

8、liferateandformrteurospheresinthemediumthatcontainsbFGFandEGF．Primaryandgenerationcellsdisplaynestin-positiveproteins．ThepercentofneurosphcresofcellsfromSVZWaSthehigbestamongthethreenervezones(o．7％，P(O